 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 14416 | 回復(fù): 7 | ||
aini_1314新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
請教幾個和Protein Thermal Shift( ThermoFluor)有關(guān)的問題，有對RT-PCR了解的也可以 已有2人參與
|
|
背景簡介（做過的可以略過）： Protein Thermal Shift（ ThermoFluor），就是測蛋白質(zhì)熱轉(zhuǎn)變穩(wěn)定性的一種技術(shù)，屬于RT-PCR技術(shù)的一種衍生用法。可以高通量的對蛋白進(jìn)行篩選，蛋白與配體的相互作用等。具體信息可以參見wiki百科。http://en.wikipedia.org/wiki/Thermal_Shift_Assay A thermal shift assay, also called Differential Scanning Fluorimetry (DSF) is a thermal-denaturation assay that measures the thermal stability of a target protein and a subsequent increase in protein melting temperature upon binding of a ligand to the protein. Life公司也推出了相關(guān)的產(chǎn)品： http://www.lifetechnologies.com/ ... -thermal-shift.html 具體原理可以簡單的理解為，蛋白有疏水區(qū)結(jié)構(gòu)，隱藏在內(nèi)部，在溫度上升時，蛋白的結(jié)構(gòu)會被打開，暴露出疏水區(qū)，熒光染料Sypro Orange就可以與該區(qū)域進(jìn)行結(jié)合，并被激發(fā)熒光。在有配體（小分子）結(jié)合的情況下，蛋白穩(wěn)定性會上升，表現(xiàn)為熔解溫度的上升（>4℃）。 實驗過程： 本實驗中使用的是Bio-rad 公司的RT-PCR儀，利用CFX Manager（Data Analysis）生成的數(shù)據(jù)如圖所示： 左圖為蛋白熔解曲線，右圖為對溫度求導(dǎo)曲線（負(fù)值）。 在實驗中設(shè)置了對照組，即圖中紅色線，加入配體（小分子）后的實驗曲線為綠色線。 問題1，為何實驗組的熔解曲線峰值偏低？ 問題2，從該熔解曲線看，是否可以認(rèn)為蛋白與小分子有相互作用？ 問題3（略業(yè)余），Bio-rad公司給出的分析程序為何要將導(dǎo)數(shù)曲線取負(fù)值？ 問題4，在類似的有熒光的反應(yīng)中，如果反應(yīng)體系中出現(xiàn)沉淀，是否會造成熒光值的劇烈變化？（數(shù)量級的變化） |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有147人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 有關(guān)RT-PCR模板RNA量的問題，請高手解答�。�！
已經(jīng)有16人回復(fù)
2樓2017-08-21 12:01:02
3樓2019-11-22 18:29:24
陳陳陳夢
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 18
- 帖子: 6
- 在線: 21分鐘
- 蟲號: 15395753
- 注冊: 2019-06-21
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
4樓2020-12-07 15:19:15
陳陳陳夢
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 18
- 帖子: 6
- 在線: 21分鐘
- 蟲號: 15395753
- 注冊: 2019-06-21
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
5樓2020-12-07 15:19:41
陳陳陳夢
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 18
- 帖子: 6
- 在線: 21分鐘
- 蟲號: 15395753
- 注冊: 2019-06-21
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
6樓2020-12-07 15:19:52
陳陳陳夢
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 18
- 帖子: 6
- 在線: 21分鐘
- 蟲號: 15395753
- 注冊: 2019-06-21
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
7樓2020-12-07 15:20:10
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
8樓2022-02-08 17:23:44
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 aini_1314 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料工程專碩274一志愿211求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京大學(xué)，080500材料科學(xué)與工程，調(diào)劑 +4 | Jy? 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 拾光任染 2026-03-15 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，材料專碩317求調(diào)劑 +5 | lx8568 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] （081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑 +12 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 35/1750 |
|
|
|
[考研] 26調(diào)劑/材料科學(xué)與工程/總分295/求收留 +9 | 2026調(diào)劑俠 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 冬十三 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | 芬達(dá)46 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ADT 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | S.H1 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +3 | 李政瑩 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|