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如何用CFDASE探針測定細(xì)菌胞內(nèi)PH值？
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最近需要測定阪崎腸桿菌胞內(nèi)的ph值，請問哪位大神親自做過這方面的實驗~~ 我用的方法是用CFSE熒光染料（東仁化學(xué)科技），但是做了幾次標(biāo)準(zhǔn)曲線，發(fā)現(xiàn)加了染料和不加染料的熒光強(qiáng)度沒有什么差別。。。。 以下是我做標(biāo)曲的方法: 1、 離心后收集細(xì)菌 2、 用包含50mmol/l EDTA的5mmol/l HEPES（ph 8）洗滌3次 3、 用包含1.5umol/l CFDASE的50mmol/l 磷酸鹽緩沖液重新懸浮細(xì)菌，30℃孵育10分鐘 4、 用50mmol/l的磷酸鉀（ph 5.8）洗滌1次 5、 用10mmol/l的葡萄糖溶液30℃ 孵育30min 6、 用50mmol/l的磷酸鉀洗滌 重新懸浮 之后將處理好的細(xì)菌置于不同ph值的緩沖液下（加了纈氨霉素和尼日利亞菌素），激發(fā)波長490nm 檢測波長520nm測熒光強(qiáng)度，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 |
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- 有沒有用熒光探針測定細(xì)菌細(xì)胞ROS，求實驗方法。。新手。謝謝
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weiwei619
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你好，請問一下你用的是尼日利亞菌素還是尼日利亞菌素鈉鹽，我最近也做這方面實驗，剛準(zhǔn)備買材料，但是網(wǎng)上基本有兩種，我有點(diǎn)糊涂，望回復(fù)，謝謝！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2016-07-14 11:59:57
云飛揚(yáng)610
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3樓2018-06-23 22:59:06
4樓2018-07-30 10:54:47
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