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喜氣洋洋金蟲 (初入文壇)
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[求助]
分步酶切 已有1人參與
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質(zhì)粒大小為6k多，由于目標(biāo)片段是3k多一點(diǎn)，酶切位點(diǎn)有三個(gè)，第一步用xho1和sac1雙酶切，37℃3h，兩條片段都是3k多一點(diǎn)，所以需要進(jìn)行第二步酶切使非目標(biāo)片段被切成2k加1k的片段。第二步將酶切產(chǎn)物用膠回收試劑盒除去上一步的buffer，然后用sca1和其對應(yīng)buffer酶切4h，跑電泳結(jié)果如圖。我測了一下質(zhì)粒濃度為600多ng/ul，懷疑是不是質(zhì)粒濃度太高，第二步酶切效率不夠。上一次我的酶切效果，三天帶大小亮度都比較均勻的，這次重復(fù)了兩次都是這個(gè)效果。請大神給看看，給點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)呀！謝謝 [ 發(fā)自手機(jī)版 http://www.gaoyang168.com/3g ] |
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2014-09-11 18:31:36, 7.12 M
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2樓2014-09-11 18:35:04
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喜氣洋洋(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-09-12 10:48:07
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3樓2014-09-11 18:48:53
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4樓2014-09-11 21:28:19
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