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sunhainan666銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)問(wèn)各位大神們，克隆基因僅僅拿到了ORF還需要繼續(xù)克隆5’和3’UTR嗎？ 已有2人參與
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進(jìn)行基因功的研究，可能會(huì)構(gòu)建超表達(dá)載體轉(zhuǎn)擬南芥和其他植物。 后期還可能做到轉(zhuǎn)錄因子和這個(gè)基因啟動(dòng)子的互作情況！ 請(qǐng)問(wèn)各位因?yàn)橹苯訌霓D(zhuǎn)錄組中拿到的序列，拿到轉(zhuǎn)錄組序列后找到ORF后blastX發(fā)現(xiàn)是全場(chǎng)ORF，是不是直接可以高保真酶拿全長(zhǎng)ORF呢？還是要一步一步中間片段，3’ 5’慢慢做呢？如果直接高保真拿到了ORF全長(zhǎng)，就我以后要做的這些實(shí)驗(yàn)，有沒(méi)有必要繼續(xù)克隆5‘和3’ UTR？ 小弟初入分子生物學(xué)，還請(qǐng)大神們多多指教！不勝感激~ |
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3樓2014-09-13 10:35:42
bioplant
木蟲 (正式寫手)
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2樓2014-09-13 07:56:52
sunhainan666
銀蟲 (小有名氣)
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4樓2014-09-13 12:14:55
bioplant
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5樓2014-09-15 06:39:12
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