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細(xì)菌素過SPE C18柱后活性消失,找不到原因
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過SPE C18柱前,細(xì)菌素有活性。過柱之后,活性消失。 我剛開始以為是不是活化未完全,導(dǎo)致細(xì)菌素沒法上柱,但我測(cè)定了上樣時(shí)的流出液,證明沒有抑菌活性,這是不是表明柱子活化完全并且細(xì)菌素已經(jīng)上樣成功了呢? 然后我用10%~100%乙腈洗脫,測(cè)定后發(fā)現(xiàn)不同濃度洗脫液都沒有抑菌活性。 我將洗脫液換成了異丙醇,洗脫液同樣沒有抑菌活性。 我用5ml甲醇和5ml超純水活化的,洗脫液各濃度4ml,用的是waters公司的Sep-Pak的C18柱,500mg/6cc。 請(qǐng)教大家了~謝謝! |
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