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JamesZu鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
各位大俠CRISPP載體連接問題請教，線上等候…… 已有2人參與
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各位大俠，最近做CRISPR載體構建，就是將自己設計好的20bp敲除位點連接到酶切后的CRISPR 15k的大載體上。提出的質粒，酶切后電泳，以及連接中的電泳圖見下。連接體系為6微升，2微升的切膠回收載體（約20ng），1微升oligo及3微升solution I。只是做了幾遍平板上總長不出陽性菌：要不一塊板一個菌不長，要不長一兩個。一鑒定又都不是陽性菌，苦惱中……望各位大俠不吝賜教�。。� Linking.jpg（連接24h取1微升電泳） NCRISPR.jpg（切膠回收后及合成的oligo） plasmid.jpg(切膠前質粒電泳) |
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2樓2014-09-18 08:45:30
3樓2014-09-18 21:06:10
JamesZu
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應助: 6 (幼兒園)
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- 專業(yè): 遺傳學與生物信息學
4樓2014-09-19 10:15:49
【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
5樓2014-09-19 10:45:42
周震宇
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 腫瘤生物治療
6樓2016-03-25 09:05:43
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