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關(guān)于雙歧桿菌的一些疑問(wèn)
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有沒(méi)有做過(guò)雙歧桿菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)化等工作的蟲(chóng)子?本人正準(zhǔn)備做雙歧桿菌表達(dá)外源性基因方面的實(shí)驗(yàn)。現(xiàn)有一些問(wèn)題沒(méi)有搞懂,希望得到各位過(guò)來(lái)人的幫助。問(wèn)題如下: 1. 雙歧桿菌的接種操作,轉(zhuǎn)化操作都需要在厭氧環(huán)境中完成嗎?如果沒(méi)有厭氧培養(yǎng)箱,只有厭氧培養(yǎng)罐,怎樣保證接種或轉(zhuǎn)化過(guò)程中的無(wú)氧環(huán)境,有沒(méi)有什么簡(jiǎn)易的裝置可以使用? 2. pET系列,pGEX系列的質(zhì)粒是否合適用來(lái)構(gòu)建能在大腸及雙歧桿菌中表達(dá)的穿梭質(zhì)粒?如果不合適,應(yīng)該使用哪一種質(zhì)粒?最好能推薦含有T7啟動(dòng)子的。 3. 雙歧桿菌中有T7 RNA聚合酶嗎,如果想要讓其獲得T7 RNA聚合酶,有什么方法。除了雙歧桿菌,有哪些厭氧菌或者兼性厭氧菌有T7 RNA聚合酶的? 4. 是否可以考慮共轉(zhuǎn)質(zhì)粒的方法,將含有目標(biāo)基因的質(zhì)粒及表達(dá)T7 RNA聚合酶的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)進(jìn)同一個(gè)雙歧桿菌中來(lái)解決問(wèn)題3? |
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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