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小-丑魚捐助貴賓 (正式寫手)
對我而言可愛的她
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[求助]
奇怪的CT值數(shù)據(jù)，拿出來和大家探討 已有1人參與
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熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，所用設(shè)備是ABI 7500. 所加模板和模板量均一致。 突變的CT 管家基因的CT 29.97 39.588 29.845 37.768 29.744 34.501 29.518 33.403 29.121 32.841 29.035 31.812 28.959 31.387 突變NTC CT:46.7 管家：38.8 突變的CT 管家基因的CT 29.802 37.531 29.948 37.141 29.795 34.733 29.427 32.95 29.085 31.995 28.84 31.459 28.834 30.848 突變NTC CT:Undetermined 管家：40.2 突變的CT 管家基因的CT 29.899 38.306 29.847 35.737 29.807 34.387 29.567 33.082 28.709 31.443 28.384 30.546 28.332 30.46 突變NTC CT:Undetermined 管家：41.16 按照實(shí)際的實(shí)驗(yàn)位置統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，可以很明顯的看出管家基因的CT值很怪異，自上至下遞減而且幅度很大，同一列第1孔和第7孔的管家CT值相差極大。 實(shí)驗(yàn)室前一晚經(jīng)過紫外殺菌，實(shí)驗(yàn)全過程無人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，全部由我一人完成，實(shí)驗(yàn)操作自認(rèn)為很小心了，但NTC還是如上，起了一點(diǎn)。 NTC起了代表污染了，但問題是，會引起這么大的差別嗎？ 通過查看以前做過的實(shí)驗(yàn)，同樣位置的數(shù)據(jù)，意外發(fā)現(xiàn)管家基因CT值也是出現(xiàn)了自上至下遞減而且幅度很大的現(xiàn)象，同一列第1孔和第8孔的管家CT值相差4-5不等， 是不是可以考慮是機(jī)器的因素？ 蟲子們有過這種情況嗎？請多指教，謝謝！ |
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2樓2014-09-24 12:17:47
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