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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 三親結合問題
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180803014新蟲 (小有名氣)
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三親結合問題 已有1人參與
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| 本人現(xiàn)在在做隨機插入，用的是psc123這個質粒，受體菌（鏈霉素50ppm）：供體菌(卡那霉素50ppm)：協(xié)助菌（氯霉素35ppm）=10:1:1，第一次的時候結合的效率挺好的，從第二次開始，結合效率就很低，結合的菌長得很少，psc123在雙抗平板上涂布上總長白色的小雜菌，但結合的上面沒長（結合的菌與雜菌能明顯分辨出來），后來換成了受體菌：供體菌：協(xié)助菌=2:1:1，結合的就直接不長了，平板上（雙抗）長的都是小的雜菌，psc123的板子上也是，后來又換成了10:1:1，但是結合的還是不長，還是長滿雜菌。以為是psc123不純，可是已經純化好多代了，就算有雜菌，難道就不結合了嗎，直接把psc123在含鏈霉素的lb平板上劃線，什么都沒長，接到含鏈霉素的lb液體里也沒長�，F(xiàn)在準備吧鏈霉素的濃度提高，但不知道會不會對結合產生影響，現(xiàn)在好苦惱，不知道什么原因，忘大神指點一二！ |
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