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馬龍sweeting木蟲 (正式寫手)
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[求助]
用confocal觀察植物根尖如何消除自發(fā)熒光干擾 已有2人參與
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| 本人用confocal觀察植物植物組織,植物根莖葉均有自發(fā)熒光,與轉(zhuǎn)入熒光蛋白及熒光染料相互干擾,請做過該方面的高手給予指導(dǎo)~~另本想手撕葉片表皮細(xì)胞,但撕下來的表皮細(xì)胞仍殘留有很多葉綠素,很難撕干凈,望指點(diǎn)~~不勝感激~~ |
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我也遇到過有自發(fā)熒光的樣本,我建議有兩個(gè)辦法: 1、自發(fā)熒光一般波長有限,所以可以選擇波長較長的紅色熒光染料進(jìn)行靶蛋白的定位; 2、如果選用藍(lán)色或綠色熒光染料,目的蛋白在組織上的分布應(yīng)該是與對照組有差異的,此時(shí)務(wù)必設(shè)置對照組,然后通過調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度、增益等參數(shù)把對照組調(diào)弱,這樣相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組上熒光可能就能看到了。 僅供參考,有實(shí)驗(yàn)的話希望能再討論。 |
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