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[交流]
PCR,WB
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大家好，最近有一個(gè)問題一直干擾著我，求助大家的幫忙與解答，就是我鑒定一種蛋白在動(dòng)物組織上的表達(dá)，我前期從基因方面做了PCR,跑膠，測(cè)序，結(jié)果都成功了，也挺理想，但是最近做WB，就是做不出來，不知道是什么原因，怎么回事啊，這種蛋白到底存在嗎？誰可以幫我深入分析分析    |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 樓主可以先查一下文獻(xiàn)看有沒有目標(biāo)蛋白在其他組織表達(dá)的報(bào)道，如果有的話是不是做了WB，用的抗體是什么。建議樓主使用和文獻(xiàn)相同的抗體。然后樓主可以用目標(biāo)組織抽提液探討一下抗體的使用條件，主要是上樣量和抗體稀釋倍數(shù)。一開始可以以看到目標(biāo)條帶（根據(jù)目標(biāo)蛋白的分子量）為目的，別擔(dān)心背景過高，等確定條帶了以后可以減少上樣量或者增加抗體稀釋倍數(shù)來降低背景。希望對(duì)樓主有幫助。 |
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22樓2014-10-18 23:22:31
7樓2014-10-18 18:56:36
簡單回復(fù)
九頭狼狗2樓
2014-10-18 18:21
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haby1118(金幣+1): 謝謝參與
。。 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ]
dmbb3樓
2014-10-18 18:28
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haby1118(金幣+1): 謝謝參與
假大空4樓
2014-10-18 18:30
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tzynew5樓
2014-10-18 18:30
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jeangong6樓
2014-10-18 18:50
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怕哦哦哦8樓
2014-10-18 18:59
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2014-10-18 19:00
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ylheping10樓
2014-10-18 19:03
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SCI-ICS11樓
2014-10-18 19:15
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祝福
qinzonghui12樓
2014-10-18 19:21
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血性紅魔13樓
2014-10-18 19:27
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91088397414樓
2014-10-18 19:35
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qqaoqq15樓
2014-10-18 20:01
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kiss2008553716樓
2014-10-18 20:05
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無為之人17樓
2014-10-18 20:08
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qqllqq18樓
2014-10-18 20:30
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xiejf19樓
2014-10-18 20:49
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1
cxjzly200820樓
2014-10-18 20:57
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gorgan21樓
2014-10-18 21:26
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haby1118(金幣+1): 謝謝參與
haby111823樓
2015-04-10 11:15
回復(fù)
送紅花一朵唉
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