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七小艾新蟲 (小有名氣)
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[求助]
游動放線菌破壁
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有沒有大神做過游動放線菌的破壁？用來提蛋白組，已經(jīng)把能試的方法基本都試了一遍，效果都不太理想，跑膠上15ul的量顏色都不如Maker上5ul的深。 已經(jīng)試過以下方法： 1.漩渦振蕩，加0.1mm的玻璃粉 2.均質(zhì)，用的是fastprep 用來提DNA的均質(zhì)管（fast DNA for soil） 3.均質(zhì)，把均質(zhì)管中的研磨介質(zhì)換成0.1mm玻璃粉 4.液氮研磨 5.液氮研磨后干粉再進行均質(zhì) 6.超聲 大神們還有沒有其他方法可以用來破碎細胞的�。� 另外有個問題，均質(zhì)用的研磨介質(zhì)直徑越大效果越好還是直徑越小效果越好？因為試劑盒自帶的均質(zhì)管中含有一個4mm的玻璃珠，1.4mm的陶制小球和0.1mm的小硅球，破壁的效果比只用0.1mm的玻璃粉作為研磨介質(zhì)的效果要稍微好一點。 |
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