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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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北化方華

鐵蟲 (初入文壇)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
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蟲號: 3187710
注冊: 2014-05-07
性別: MM
專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能

[求助] 質(zhì)粒重組后雙酶切沒有條帶，求大神幫忙分析一下已有1人參與

最近在做質(zhì)粒重組，質(zhì)粒用的PYES2，約6kb，目的基因2500kb，重組轉(zhuǎn)化后提質(zhì)粒有三條帶，做單酶切驗(yàn)證大小在8kb以上，做雙酶切沒有條帶，分開酶切第一個(gè)酶切開后有條帶，膠回收后用第二個(gè)酶切什么都沒有，兩小時(shí)四小時(shí)都沒有？不知道是什么原因，是沒有轉(zhuǎn)進(jìn)去嗎？還是酶切條件不當(dāng)。

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1樓 2014-10-22 21:22:22

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caihang

銅蟲 (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2014-10-23 12:32:54

單酶切出現(xiàn)8K的條帶，證明已經(jīng)轉(zhuǎn)進(jìn)去了。你第二次酶切之后沒東西，可以考慮酶或buffer的問題，還有酶切時(shí)使用的槍頭，無菌水等等有沒有被污染。

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回復(fù)此樓

2樓2014-10-23 11:19:05

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