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LeonardoChen金蟲(chóng) (小有名氣)
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酶標(biāo)儀有活性,但是液相打不出來(lái)是什么原因?!
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用酶標(biāo)儀檢測(cè)酶活,用細(xì)胞破碎液(1g濕菌體+10mL硫酸鉀緩沖液)催化,分別加入底物和輔酶(NADH),檢測(cè)結(jié)果顯示活性是比較高的。 但是,分別用破碎液和全細(xì)胞催化,液相結(jié)果沒(méi)有出現(xiàn)產(chǎn)物的峰。反應(yīng)體系為:1g濕菌體,10ml pH7.0硫酸鉀緩沖液,5g/L 葡萄糖,5g/L底物。 1g濕菌體(破碎過(guò)的),10ml pH7.0硫酸鉀緩沖液,5g/L底物,適量濃度的輔酶NADH。反應(yīng)時(shí)間為24h,在12h,18h,24h取樣。但是液相只有底物的峰,沒(méi)有產(chǎn)物的峰。 |
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