 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1161 | 回復(fù): 0 | ||
花貓愛吃糖新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
鼠李糖脂的分離提取和定性定量研究——假黃單孢菌
|
|
一、背景介紹 1、前期分離得到一株假黃單孢菌，暫命名為【菌株P(guān)】。據(jù)16sDNA分析結(jié)果繪制系統(tǒng)進(jìn)化樹，知其與已報(bào)到的【假黃單孢菌A】同源性達(dá)100%。已知A能產(chǎn)生具有表面活性的物質(zhì)，但未指明其具體結(jié)構(gòu)（2006）。 2、另一報(bào)道稱【假黃單孢菌B】亦能產(chǎn)生表面活性物質(zhì)，質(zhì)譜分析鑒定其結(jié)構(gòu)為鼠李糖脂。這是第一篇關(guān)于假黃單孢菌產(chǎn)鼠李糖脂的報(bào)道（2009）。 3、目前用于鼠李糖脂研究、生產(chǎn)的菌種幾乎都是銅綠假單胞菌，而關(guān)于假黃單孢菌代謝產(chǎn)物的表面活性研究相對(duì)較少。 4、預(yù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模旱谝�，�?yàn)證【菌株P(guān)】是否產(chǎn)表面活性物質(zhì)；第二，若產(chǎn)，其類型是否為鼠李糖脂。 二、已開展的工作 1、按照【假黃單孢菌B】和【銅綠假單胞菌H】的配方分別進(jìn)行了兩次發(fā)酵，接種量分別為4%和10%。兩次發(fā)酵均為唯一碳源實(shí)驗(yàn)，分別選用了玉米油、花生油和葵花籽油，其他成分相同�！炯冱S單孢菌B】配方所得發(fā)酵液為【乳白色】，【銅綠假單胞菌H】配方所得發(fā)酵液為【棕黃色】。 2、排油圈實(shí)驗(yàn)：9cm培養(yǎng)皿內(nèi)加入20mL去離子水，上加400uL液體石蠟，并使之均勻分散形成油膜，加入50uL發(fā)酵液。約1s遲疑后，立刻形成排油圈，但圈過大，最終能將液體石蠟擠到正中央聚集成團(tuán)。 3、【假黃單孢菌B】配方所得【乳白色】發(fā)酵液的分離提取：用6M HCl將發(fā)酵液的pH調(diào)至2，4℃冷藏過夜，離心去除白色絮狀沉淀，取上清液用等體積乙酸乙酯萃取兩次，合并有機(jī)相45℃旋蒸，蒸干物用甲醇洗下后揮干，得粗提物【油狀液體，顏色為棕紅至玫瑰紅不等】。將該粗提物10uL溶解于5mL去離子水中，所得溶液的表面張力在26-29mN/m不等。 4、鼠李糖標(biāo)品配成5mg/mL、500ug/mL、50ug/mL和5ug/mL【水溶液】，200-800nm全波長掃描均未見吸收峰。 三、質(zhì)疑： 1、有文獻(xiàn)提到，可通過發(fā)酵液的顏色及深淺大致判定表面活性產(chǎn)物的類型和含量高低，可否詳細(xì)說明？ 2、排油圈：我把發(fā)酵液換成玉米油、花生油和葵花籽油，想做陰性對(duì)照，但為神馬也能產(chǎn)生排油圈~~o(>_<  o ~~是油相不應(yīng)該選擇液體石蠟？還是液體石蠟太少？還是………3-1、分離提�。喊l(fā)酵液調(diào)到pH=2時(shí)產(chǎn)生的白色絮狀沉淀是什么？有文獻(xiàn)說鼠李糖脂在pH=8時(shí)溶解度最大，在pH=2時(shí)溶解度最小，那么發(fā)酵液調(diào)pH為2后就應(yīng)該收集絮狀沉淀而不是取上清液繼續(xù)萃取咯？那為什么我的萃取物能表現(xiàn)出表面活性呢？ 3-2、分離提�。捍痔嵛锏念伾珵樽丶t到玫瑰紅不等，并非文獻(xiàn)所說的棕黃色油狀物，是否與我的菌株本身會(huì)產(chǎn)紅棕色的色素有關(guān)？這種色素在原來配方的培養(yǎng)基中確有產(chǎn)生，但水溶性很好并有很強(qiáng)的吸濕性，醇溶性極差、微溶于乙醇、幾乎不溶于石油醚。那么這種水溶性的色素又是如何跑到甲醇中去的呢？是否產(chǎn)生了新類型的色素？ 4、全波長掃描：鼠李糖在可見光區(qū)應(yīng)該有吸收峰，480nm、620nm均有人提及，為什么我沒有掃出來吸收峰，而是一個(gè)大L型曲線？（酶標(biāo)儀紫外掃描） 5、定量研究：求問測過鼠李糖脂含量的各位師兄師姐，苯酚硫酸法和硫酸蒽酮法哪一個(gè)可操作性強(qiáng)？ 首次發(fā)帖的小碩跪求指導(dǎo) |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
304求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
材料工程專碩調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿天大材料與化工（085600）總分338
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
求材料調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
294求調(diào)劑材料與化工專碩
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以）
已經(jīng)有3人回復(fù)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 花貓愛吃糖 的主題更新
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 294求調(diào)劑材料與化工專碩 +5 | 陌の森林 2026-03-18 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +8 | llllkkkhh 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研]
 271材料工程求調(diào)劑
+4
|
.6lL 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 305求調(diào)劑 +3 | FY_yy 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 陽陽哇塞 2026-03-14 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | pupcoco 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | △小透明* 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +4 | 張vvvv 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 285化工學(xué)碩求調(diào)劑（081700） +9 | 柴郡貓_ 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 070300化學(xué)學(xué)碩求調(diào)劑 +6 | 太想進(jìn)步了0608 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 求調(diào)劑 +13 | enenenhui 2026-03-13 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 22408總分284求調(diào)劑 +3 | InAspic 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +4 | 學(xué)員97LZgn 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學(xué)上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +3 | 小匕仔汁 2026-03-12 | 3/150 |
|