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qiuzhen8809新蟲 (小有名氣)
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[求助]
懸浮結(jié)團(tuán)細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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有沒有做過懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，有什么注意事項(xiàng)嗎？ 小妹要做一株懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，之前沒做過，小白一個(gè)。 有些不太懂的地方，望各路大神不吝賜教：  1. 在孔板轉(zhuǎn)染過程中，應(yīng)該如何換液？需要孔板離心還是直接吸取上清？大概去除多少培養(yǎng)液？ 直接吸取的話會不會同時(shí)吸走一部分細(xì)胞？ 2. 細(xì)胞容易結(jié)團(tuán)，在轉(zhuǎn)染過程中需要經(jīng)常吹打嗎？ 3. 兩步篩選是怎么做的？從24孔板中用有限稀釋法挑到96孔板中，然后繼續(xù)加抗性篩選再挑到96孔板中嗎？ 4. 關(guān)于有限稀釋法，在24孔板中轉(zhuǎn)染后經(jīng)過篩選后，怎么根據(jù)細(xì)胞數(shù)進(jìn)行稀釋？要每個(gè)孔數(shù)細(xì)胞嗎？ 5. 搖瓶液體培養(yǎng)應(yīng)該在哪一步開始進(jìn)行？  |
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qiuzhen8809
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沒有人回答嗎 2樓2014-11-24 14:04:04
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3樓2014-11-28 10:51:15
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