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wlq474797805銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
新蟲蟲關(guān)于蛋白質(zhì)標(biāo)記的問題~有沒有不受溫度影響的標(biāo)記或者染色蛋白質(zhì)的方法
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各位蟲大俠~我是個(gè)新手 最近在考慮想做蛋白質(zhì)的標(biāo)記，然后對(duì)它進(jìn)行加熱，在加熱過程中用光鏡、透鏡或者掃鏡等觀察這個(gè)蛋白質(zhì)在加熱過程中的一系列形態(tài)上的變化，想請(qǐng)問下有木有什么好的染色或者標(biāo)記的方，或者標(biāo)記試劑，可以不受加熱的影響？（加熱溫度大概在20-70度）【ps:這個(gè)蛋白質(zhì)可能在加熱過程中發(fā)生凝集，或者斷裂成已知的兩部分】本人是剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的菜鳥，最近查了不少文獻(xiàn)，大多數(shù)熒光標(biāo)記都用的免疫熒光標(biāo)記，但是我的蛋白需要加熱看各種變化，用免疫的方法標(biāo)記感覺會(huì)受到加熱的影響啊~~~ 求各位大俠幫忙啊~~~  |
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我對(duì)這個(gè)不是很懂，你是說不做雙向電泳，只用里面的Cy2 Cy3 Cy5進(jìn)行標(biāo)記嗎？我這個(gè)蛋白質(zhì)需要后面和其他蛋白質(zhì)一起加熱然后看它在其他蛋白質(zhì)存在的情況下加熱時(shí)的變化，如果用Cy2 Cy3 Cy5標(biāo)記的話，其他蛋白質(zhì)是不是也會(huì)被標(biāo)記上呀？我是想只標(biāo)記這一種蛋白 3樓2014-11-22 14:43:02
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但是免疫標(biāo)記應(yīng)該有溫度的限制吧？ 我的溫度范圍在20-70之間，免疫標(biāo)記是不是會(huì)受影響呀？ 另外我這個(gè)蛋白在加熱過程中還會(huì)發(fā)生斷裂  。。。是不是也有影響？不過我在網(wǎng)上有查到這個(gè)蛋白斷裂后的兩個(gè)部分的免疫標(biāo)記物，只是不知道能不能在這樣的高溫下使用？ 或者可不可以在整個(gè)觀察過程中，同時(shí)用斷裂前和斷裂后兩種免疫標(biāo)記物標(biāo)記，在它加熱過程中斷裂前后分別自動(dòng)和環(huán)境中相應(yīng)的標(biāo)記物結(jié)合？（  我這個(gè)想法是不是太天真了。。。）額，我比較凌亂。。。 |
5樓2014-11-23 10:51:15
billtsu
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6樓2014-11-23 19:14:08
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7樓2014-11-23 20:38:59
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8樓2014-11-23 21:36:09
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9樓2014-11-23 21:37:29
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可以具體地講一下嗎？不是很懂10樓2014-11-23 21:38:48
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