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lb培養(yǎng)基配方與tb培養(yǎng)基配方 已有1人參與
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LB培養(yǎng)基和TB培養(yǎng)基這兩種培養(yǎng)基名字有點(diǎn)像，它們之間的區(qū)別在哪呢?首先是用途上，LB經(jīng)常用來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種，而TB培養(yǎng)基則用于慢病毒載體等多種實(shí)驗(yàn)中，另外，兩者的配方也是大有不同的。一起了解一下吧。 TB培養(yǎng)基的配方 去離子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml 搖動(dòng)容器使溶質(zhì)完全溶解，在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當(dāng)溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時(shí)加入100 ml無(wú)菌的0.17 nol/L KH2PO4，0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是：用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4，完全溶解后，用去離子水定容至 100 ml，在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。) LB培養(yǎng)基的配方 10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉 加去離子水至1L 調(diào)PH 7.0-7.2 分裝 滅菌 即可用之 配方區(qū)別： TB培養(yǎng)基，Terrific肉湯(Terrific Broth，TB) 去離子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g， 酵母提取物 24 g， 甘油 4 ml 搖動(dòng)容器使溶質(zhì)完全溶解，在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。當(dāng)溶液冷卻至 60°C或 60°C以下時(shí)加入100 ml無(wú)菌的0.17 nol/L KH2PO4，0.17 nol/L K2HPO4(該溶液的配置方法是：用90 ml 去離子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4，完全溶解后，用去離子水定容至 100 ml，在 15 psi (1.05 kg/cm2)高壓下蒸汽滅菌 20 min 。) LB培養(yǎng)基的配方如下： 胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化鈉(NaCl) 5g/L 另外根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值用NaOH調(diào)節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達(dá)到7.4(該pH適合目前使用最廣的原核表達(dá)菌種E.coli的生長(zhǎng)) 其他區(qū)別：TB培養(yǎng)基是一種通用微生物培養(yǎng)基，用于各種微生物的培養(yǎng)。LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過(guò)改造的無(wú)法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌. 最后，值得注意的是，LB培養(yǎng)基配制好后，一定要在冷卻前加好抗生素。配TB培養(yǎng)基時(shí)，最后分開滅菌，否則配出來(lái)的培養(yǎng)基容易因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)缺失而發(fā)黑。好了，最后祝大家實(shí)驗(yàn)成功。 |
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2樓2015-03-03 17:11:04
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