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微生物發(fā)酵液次級代謝產(chǎn)物分離問題。。很急啊。。希望能有人來幫我 已有4人參與
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情況是這樣的，我的一株鏈霉菌發(fā)酵液具有抑菌活性，效果比較好，那么我就想得到這個物質(zhì)或是這些物質(zhì)，那么就進行發(fā)酵萃取，目前主要是為了摸萃取條件，就小量發(fā)酵萃取試試，發(fā)酵液為100ml，萃取液等體積，萃取的時候進行了分段萃取，用了石油醚，氯仿，乙酸乙酯和正丁醇，在萃取過程中，石油醚乳化現(xiàn)象比較嚴重，就萃取了兩次然后水相，有機相，中間層都保留了，，其他實際乳化比較輕，就都保留了水相和有機相，各個有機相經(jīng)旋蒸濃縮后，用各自的萃取劑溶解，然后各個水相，中間層，有機相過0.22微米的濾膜除菌，進行抑菌活性的追蹤。 結(jié)果不盡人意，萃取完之后的水相基本都有抑菌活性，也就是說基本沒把物質(zhì)從發(fā)酵液里萃取出來，只有石油醚的水相活性貌似減小，不過不是非常明顯，奇怪的是石油醚的乳化層貌似有抑菌活性，大小跟抑菌強度和石油醚的水相相當，但是石油醚的粗提物也就是有機相是一定沒有抑菌活性的。。。再者就是氯仿的粗提物也多少有一些一點點抑菌活性，但是其水相抑菌活性減弱不明顯。其他試劑萃取的就一點抑菌活性都沒有了。。。在做抑菌活性的時候，粗提物相當于濃縮了嘛，用量為20微升，發(fā)酵液，水相和石油醚中間層用的100微升，不知道這個影響有多大。 總之，給我的感覺就是具有抑菌活性的物質(zhì)及不親脂也不親水，當然也多少提供了一點信息，貌似這個物質(zhì)能在石油醚的萃取下出來，不過但是進不了石油醚里面，也許它的親脂能力沒那么強？？？ 反正現(xiàn)在很糾結(jié)，不知道該怎么處理了。。我現(xiàn)在就是用原來的各個相又做了一次抑菌活性實驗，這次粗提物用量加大了一下，加了50微升，過兩天才能根據(jù)抑菌圈大小來判斷，，，情況大體就是這么個情況了。。不知道有沒有在這方面有過研究的師兄師姐或是大神能給我指點一下。。。對于這種怎么也從發(fā)酵液里萃取不出來的物質(zhì)該怎么辦呢？？？？求指點 ��！~~~~~~ |
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