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楊德斌

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[交流] EDC，NHS水中酰化反應(yīng)的一些問(wèn)題，不要求您把每一個(gè)問(wèn)題都能回復(fù)地很清楚，重在交流。

最近在水中做�；磻�(yīng)，有一些問(wèn)題一直沒(méi)搞清楚，請(qǐng)教各位。
1. 羧酸鈉在活化之前要不要加酸游離？
2. 有報(bào)道稱，EDC最佳活化pH范圍在4~6，如何調(diào)節(jié)？如果用MES緩沖液的話，其離子強(qiáng)度一般選用多少 mM 比較合適？
3. 非常重要的一點(diǎn)，EDC、NHS與羧基的比例，加入順序，活化溫度，活化時(shí)間？
4. 因?yàn)槲业牟被且喳}酸鹽的形式存在的，是不是在加入之前應(yīng)該用碳酸鈉或者碳酸鉀等堿進(jìn)行游離使其成-NH2形式？
5. 在氨基羧基溶液混合之后，其pH會(huì)出現(xiàn)一定的變化，請(qǐng)問(wèn)最終反應(yīng)體系的pH是多少合適？
有人說(shuō)，活化在弱酸條件下比較好，這個(gè)沒(méi)有異議，但是酰胺鍵偶合在堿性條件下比較好，因?yàn)檫@樣活化酯鍵才能更好斷掉，然后與-NH2偶聯(lián)。如果這樣的話，是不是應(yīng)該再加入PBS緩沖液，使其pH變成弱堿性，pH調(diào)到幾比較合適？但也有人認(rèn)為，自始至終應(yīng)都在弱酸條件下反應(yīng)，所以有的人一直在pH 6條件下做反應(yīng)。據(jù)說(shuō)，pH是影響反應(yīng)產(chǎn)率的關(guān)鍵因素，尤其是小分子與大分子之間的酰胺反應(yīng)或者大分子之間的酰胺反應(yīng)，牽涉到一個(gè)接枝率的問(wèn)題。如何更好地提高反應(yīng)效率，求大神指導(dǎo)。

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羧基活化EDC|DCC,NHS

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1樓 2014-12-17 16:26:33

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