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zbbrian木蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于福林酚法測醬油曲中酸性蛋白酶的問題 已有1人參與
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本人一直使用國標介紹的福林酚法測醬油曲中的酸性蛋白酶。現(xiàn)在遇到的問題是每樣3組平行，另有一管是空白，按照國標的方法，空白應(yīng)該是加TCA使粗酶液失活，再加入2%酪蛋白。過程中對粗酶液加入TCA并未有白色沉淀產(chǎn)生，溶液澄清，不知各位是如何確定粗酶液的失活狀態(tài)，而終止反應(yīng)時加入TCA則 會有白色沉淀產(chǎn)生。 最后是在660nm下測吸光值，空白組的結(jié)果與樣品組的差別不大（例如0.183（樣）與0.156（空白）這種水平），如再按照國標扣去空白，計算的酶活就會的不正常。 因此這個問題困擾了我很久，緩沖液及試劑是當(dāng)天配的，溫度和時間也都按照要求控制，只有空白組的數(shù)據(jù)讓我一直不知如何處理，希望大家給我指點~~  |
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2樓2015-03-17 15:32:39
zbbrian
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
zbbrian: 金幣+5, ★★★很有幫助 2015-09-18 14:52:31
zbbrian: 金幣+5, ★★★很有幫助 2015-09-18 14:52:31
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建議采用沸水浴使酶失活，然后加TCA沉淀蛋白，空白采用同樣方法使酶失活，效果好些。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2015-09-18 11:48:37
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