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北京石油化工學(xué)院2026年研究生招生接收調(diào)劑公告

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chdliusong

木蟲 (小有名氣)

應(yīng)助: 1 (幼兒園)
金幣: 2461.8
帖子: 191
在線: 155.7小時(shí)
蟲號: 2400781
注冊: 2013-04-04
性別: GG
專業(yè): 植物生理與生化

[求助] 植株Cd亞細(xì)胞分布以及化學(xué)結(jié)合形態(tài)測定

b]Cd 亞細(xì)胞分布以及化學(xué)結(jié)合形態(tài)測定
小弟第一次做植物Cd亞細(xì)胞分布以及化學(xué)結(jié)合形態(tài)測定，希望做過這方面實(shí)驗(yàn)的大俠能給予建設(shè)性的指導(dǎo)，每部分各150金幣，可追加（50~100）

，希望完整回答一個(gè)或兩個(gè)問題，不甚感激。
問題1 :關(guān)于植物Cd亞細(xì)胞分布文獻(xiàn)方法（差速分級離心）：先將冷凍的樣品倒入研缽中，加入預(yù)冷的提取劑（50 mM Tris-HCl，250 mM sucrose 和 1.0 mM C4H10O2S2，pH 7.5），然后迅速研磨成勻漿狀。將勻漿用 80 μm 的尼龍濾膜過濾，濾渣即為細(xì)胞壁及殘?jiān)糠�；濾液在 20000 g 下離心 45 min，底層碎片為細(xì)胞器組分（液泡除外），上層懸浮液為細(xì)胞質(zhì)組分（含胞質(zhì)及液泡內(nèi)高分子和大分子有機(jī)物及無機(jī)離子）。各組分在 70˚C 烘干至恒重并用 HNO3-HClO4（4:1 v/v）進(jìn)行消解。用火焰原子吸收分光光度計(jì)測定 Cd 含量。采用國家標(biāo)準(zhǔn)參比物質(zhì)（植物 GBW-07605）進(jìn)行分析質(zhì)量控制。我采用Cd脅迫濃度100μmol/L處理植物，學(xué)�；鹧嬖游辗止夤舛扔�(jì) 檢出限是0.001-0.1mg/ml。
  Q:取鮮樣量（葉部，根部）多少合適（植株偏�。�？預(yù)冷試劑濃度是否需要微調(diào)，C4H10O2S2母液配制多大合適，易溶否？離心力，離心時(shí)間是否需要微調(diào)，離心后轉(zhuǎn)移問題，是否必須全程4℃操作？70˚C烘干烘箱抑或其它？濕法消解注意事項(xiàng)（沒電加熱板，普通電爐可否；HF，過氧化氫用量，消解時(shí)間參考，顏色問題，消解完全判斷及其它）？其它注意事項(xiàng)及大俠心得？

問題2：植物Cd化學(xué)結(jié)合形態(tài)測定文獻(xiàn)方法（連續(xù)浸提法）：I)將樣品切碎成細(xì)片，II）將樣品浸沒在 37.5 ml 的提取劑中，并在 30˚C 下保溫 18h ， iii）回收提取液，再在離心管中加入 37.5 ml 的相同提取劑，浸提 2 h 后再次回收提取液  ，iv)使用相應(yīng)的提取劑重復(fù)步驟 ii 和iii  ，v）將收集的提取液（150 ml）于消解罐中蒸發(fā)近干后，用 HNO3-HClO4（4:1 v/v）進(jìn)行消解，火焰原子吸收分光光度計(jì)測定 Cd 含量(提取劑分別為80%  乙醇；去離子水；1mol/L NaCl ；2%  醋酸，剩余殘?jiān)?
  Q:鮮樣（葉部，根部）用量多少較為合適（植株偏�。�？不同提取劑濃度是否已為最佳，提取劑用量是否如上？保溫溫度，時(shí)間是否需要微調(diào)，是否同時(shí)需要振蕩？消解罐如用高腳燒杯代替，需注意什么？其它注意事項(xiàng)及大俠心得？

            新的一年，同時(shí)祝蟲友們心想事成！

回復(fù)此樓

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1樓 2015-01-03 19:26:07

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