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15269179761銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助關(guān)于腫瘤藥物處理的問題 已有1人參與
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本人剛開始進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段,很多東西都處于空白階段。我的實(shí)驗(yàn)大體是做藥物對腫瘤細(xì)胞影響的,現(xiàn)在遇到的問題是,我要用藥物處理細(xì)胞,接下來就需要分析一些相關(guān)基因的表達(dá),還有蛋白表達(dá)的情況。我現(xiàn)在不太明白,如果我的藥是抑制細(xì)胞增殖的,那我處理細(xì)胞的時候是選擇多大的藥物濃度,如果選擇抑制能力最強(qiáng)的濃度,那最后分析基因表達(dá)的時候或者做WB的時候,有死細(xì)胞不會對結(jié)果造成影響么,會不會分不清到底細(xì)胞死亡造成與對照的表達(dá)差異還是藥物本身能夠影響到腫瘤細(xì)胞蛋白基因的表達(dá)。忘各位大神不要笑我,我剛開始做。 |
銅蟲 (小有名氣)
嘿嘿 真是新手啊 ,你確定的這個濃度最終不會只是一個濃度的,最少也是有3個啊要不你paper 怎么上結(jié)果, 既然要做增殖抑制那MTT,XTT哪些的肯定要先做出來確定藥物對這個細(xì)胞的IC50或是存活率吧,然后一般選在IC50以下的3個濃度做后續(xù)mRNA和protein,這方面文章很多,至于你說的死細(xì)胞的問題,哎,真不是問題,一般提取細(xì)胞蛋白前都會PBS洗細(xì)胞培養(yǎng)孔的,死細(xì)胞培養(yǎng)基什么的,就影響很低了 |
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