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bio.shk鐵桿木蟲 (正式寫手)
真相只有一個
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[交流]
Co-ip：兩種過表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)同一株細(xì)胞里，檢測兩個蛋白的相互作用 已有1人參與
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求助： 1. 兩種質(zhì)粒的量怎么加？是1：1嗎？ 2. 怎么加質(zhì)粒？是同時加進(jìn)去，還是先轉(zhuǎn)進(jìn)去一個穩(wěn)定之后再轉(zhuǎn)另一個？ 3. 需要細(xì)胞量是多少？ 謝謝�。�！ |
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3樓2015-01-08 10:20:08
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5樓2015-01-08 13:41:22
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bio.shk: 金幣+2, 謝謝 回復(fù)的很詳細(xì) 2015-01-09 11:50:28
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一般兩種一起加進(jìn)去比較省事，實驗周期短。兩種的比例，要根據(jù)具體情況分析，如果沒有其他信息輔助，那就1:1加。轉(zhuǎn)的方法很多，脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑比較常用，電轉(zhuǎn)，或者其他轉(zhuǎn)染的方法都可以嘗試。 細(xì)胞的用量，取決于你特定蛋白的表達(dá)量，Co-iP也不大熟，看看別人的回答吧 |
6樓2015-01-08 16:01:29
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7樓2015-01-09 11:51:38
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8樓2015-01-09 12:03:48
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9樓2015-01-09 14:53:12
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bio.shk: 金幣+8, 嗯 回復(fù)的很詳細(xì) 謝謝 2015-01-11 19:29:54
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1：可以1:1加；之后視情況調(diào)整。 2：都可以，穩(wěn)賺后的效果更明顯（但假陽性可能也更高）。推薦先做瞬轉(zhuǎn)再看情況，一般瞬轉(zhuǎn)就可以了。 3：我一般用60mm dish，足夠。不放心可以多做一點，我第一次100mm做的。之后都60mm。 另：不相容性主要在原核細(xì)胞中需要考慮。瞬轉(zhuǎn)到真核沒必要考慮。 |
10樓2015-01-09 23:52:36
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