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wang1990tl金蟲 (小有名氣)
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[求助]
茶多糖水解單糖分析問題求助
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各位前輩，我想用粗提的普洱茶茶多糖做水解條件摸索。 用乙酸乙酯萃取除去部分色素后，經(jīng)過二氯甲烷（氯仿一直買不到）、正丁醇除去蛋白之后得到的粗多糖（褐色），總糖含量23.4%、酚類物質(zhì)18.8%、蛋白含量16.2%。 20mg粗多糖用2ml、2M的TFA水解。水解過程中有褐色沉淀，而且水解液也有顏色，我做了90℃，4、8、12h的水解，顏色越來越淺。水解液用氮?dú)獯蹈蒚FA，DD水復(fù)溶，每200μl分裝一個(gè)EP管凍干。 氮吹結(jié)束后水解管底部都是褐色的固體貼在水解管上，不知道一般水解之后是什么樣子的，而且復(fù)溶之后離心有沉淀（在水解之后，水解液我都過了0.22μm的濾膜、12000rpm離心了5min）。 凍干的時(shí)候發(fā)現(xiàn)有黑色顆粒，特別是8h的黑色顆粒最多，4h和12h的水解液在凍干后是淺褐色顆粒，看看網(wǎng)上討論是碳化了。 不知道我的操作過程有沒有問題，發(fā)酵實(shí)驗(yàn)室從來沒有人做過單糖分析，還請(qǐng)各位能幫幫忙！金幣不多，見諒！ |
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