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[求助]
定量PCR 已有10人參與
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各位大神，我最近在做定量PCR，是個(gè)新手，遇到了一些問(wèn)題，拜托各位指點(diǎn)！我的實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增曲線沒(méi)有出現(xiàn)平臺(tái)期，請(qǐng)問(wèn)這是怎么回事？ 擴(kuò)增曲線.jpg 熔解曲線.jpg |
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huangchj03
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
悠悠飄楊: 金幣+5, ★有幫助 2015-01-22 08:53:12
悠悠飄楊: 金幣+5, ★有幫助 2015-01-22 08:53:12
| 提一些改進(jìn)建議：第一，增加模板加入的量，第二擴(kuò)大反應(yīng)體系；第三；增加5個(gè)循環(huán)，不要擔(dān)心引物二聚體的出現(xiàn)，根據(jù)你的結(jié)果來(lái)看，頂多是陰性對(duì)照出現(xiàn)二聚體，只要你的樣本沒(méi)有出現(xiàn)雙峰就沒(méi)問(wèn)題；第四；添加一些DMSO等增強(qiáng)劑（也能改善引物二聚體情況），注意同時(shí)增加引物加入量；第五，采用好一點(diǎn)的試劑盒。祝好 |
14樓2015-01-21 11:54:13
ptttmt
銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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2樓2015-01-15 13:02:54
3樓2015-01-15 13:29:50
4樓2015-01-15 13:30:31
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