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克拉克肯特

至尊木蟲 (著名寫手)

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[求助] 求一句翻譯，藍(lán)白篩選相關(guān)

Tryptic soy agar plates are made containing a diluted overnight culture of a reporter strain, the appropriate antibiotic to maintain the reporter, and X-GAL (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-d-galactopyranoside) as a reagent to detect β-galactosidase activity.Following incubation, the plates containing hla::lacZ will become intensely blue due to high hla expression and thus production of β-galactosidase enzyme, while plates with spa::lacZ will become very light blue.

是兩句，所以20金幣好了。。我沒看懂hla基因和spa基因和那個(gè)半乳糖苷酶關(guān)系

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朋友并不時(shí)常想起，但卻無(wú)處不在。

1樓 2015-01-17 17:36:05

已閱回復(fù)此樓關(guān)注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

ssssllllnnnn

至尊木蟲 (知名作家)

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【答案】應(yīng)助回帖

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克拉克肯特: 金幣+20, 翻譯EPI+1, ★★★★★最佳答案 2015-01-19 09:03:51

這是一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)，用于篩選某些QSI抑制物。其實(shí)這兩句話本身是很容易的，我估計(jì)你對(duì)這個(gè)系統(tǒng)不了解，所以可能不知道作者在說(shuō)什么。所以我就不翻譯了，只要是用我自己的話給你解釋一下這個(gè)系統(tǒng)就可以了。

背景：hla和spa都是細(xì)菌（這里是金葡菌）的表達(dá)產(chǎn)物，而且在細(xì)菌的不同生長(zhǎng)介導(dǎo)表達(dá)水平是不同的：spa在細(xì)菌繁殖時(shí)高表達(dá)，而hla則在細(xì)菌靜息是高表達(dá)，人們也在試圖利用這個(gè)特定去尋找抗菌的辦法。

篩選系統(tǒng)：目的是尋找對(duì)hla和spa的表達(dá)具有調(diào)節(jié)作用的物質(zhì)某些物質(zhì)（這里是小分子物質(zhì)）。要實(shí)現(xiàn)這一目的，必需有一個(gè)方便、便于檢測(cè)的系統(tǒng)。因?yàn)殡m然可以直接檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)源性hla和spa的表達(dá)水平，但無(wú)法用于大規(guī)模（如高通量）篩選。為了解決這一問(wèn)題，所以就建立了這一檢測(cè)系統(tǒng)。在該系統(tǒng)中，首先是構(gòu)建可以表達(dá)融合蛋白的表達(dá)載體，這里就是文中提及的hla::lacZ和spa::lacZ。其中前者（hla::lacZ）表達(dá)產(chǎn)物是α-毒素與β-gal的融合蛋白，后者則為蛋白A與β-gal的融合蛋白。如果對(duì)這一技術(shù)不了解，那我在用更通俗的話說(shuō)一下：就是將這兩個(gè)載體導(dǎo)入細(xì)菌后，就可以表達(dá)出上述兩種融合蛋白。為什么要融合蛋白？便于檢測(cè)！就是說(shuō)，只要在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)向培養(yǎng)基內(nèi)加入X-GAL，那么X-GAL就可以與含有β-gal的融合蛋白反應(yīng)，產(chǎn)物引起培養(yǎng)基顏色的變化，而且顏色變化的程度反映了融合蛋白表達(dá)水平的高低。在本例中，hla融合基因的表達(dá)水平很高，所以藍(lán)顏色非常深，而spa融合基因表達(dá)水平相對(duì)較低，故而呈淺藍(lán)色。

在具體篩選時(shí)，如果加入的小分子物質(zhì)對(duì)hla:lacZ的表達(dá)有明顯抑制作用，則該融合基因的表達(dá)產(chǎn)物明顯減少，所以顏色由深藍(lán)明顯變淺，甚至干脆變?yōu)闊o(wú)色或白色；類似的，如果小分子物質(zhì)對(duì)spa:LacZ的表達(dá)具有明顯促進(jìn)作用，則顏色也由淺明顯變深。話劇話說(shuō)，通過(guò)觀察培養(yǎng)基顏色的變化就可以判斷所篩選的小分子物質(zhì)是否對(duì)該基因的表達(dá)有調(diào)節(jié)作用。

不知道你明白了沒有，慢慢折磨一下吧。

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回復(fù)此樓

2樓2015-01-19 04:30:29