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營養(yǎng)瓊脂顆粒培養(yǎng)基說明
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營養(yǎng)瓊脂(NA)瓶裝顆粒培養(yǎng)基 【貨號、規(guī)格、產(chǎn)品形態(tài)及包裝形式】 【用途】 用于細(xì)菌總數(shù)測定、純培養(yǎng)及保存菌種，也可用于消毒效果測定。 【檢驗(yàn)原理】 蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。 【配方成分】 配方（每升） 含量 蛋白胨 10g 牛肉膏粉 3g 氯化鈉 5g 瓊脂 15g 最終pH 7.3±0.2 【使用方法】 1、 稱取本品33g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min，備用。 2、 (食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL)，放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)，充分振搖，即為1：10的均勻稀釋液。依次做1：100，1：1000……稀釋液。 3、 根據(jù)對樣品污染情況的估計，選擇2—3個合適的稀釋度，分別在做10倍稀釋的同時，吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中，每個稀釋度做2個平皿。 4、 稀釋液移入平皿后應(yīng)及時將涼至46℃左右的培養(yǎng)基注入平皿約15mL，并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻，同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照。待瓊脂凝固后，倒置于36±1℃溫箱中培養(yǎng)48±2h。 5、 觀察結(jié)果。 6、 菌落計數(shù)方法： 做平板菌落計數(shù)時，可用肉眼觀察，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏，在計下各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。 7、 菌落計數(shù)的報告： 選取菌落數(shù)在30—300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)。一個稀釋度使用兩個平板，應(yīng)采用兩個平板平均數(shù)，其中一個平板有較大片狀菌落生長時，則不宜采用，而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù)，若片狀菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均勻，即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數(shù)。平皿內(nèi)如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線)，若僅有一條鏈，可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈，則應(yīng)將每條鏈視為一個菌落計。 A：稀釋度的選擇： 應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30—300之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之。 若有兩個稀釋度.其生長的菌落數(shù)無均在30—300之間，則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2，則應(yīng)報告其平均數(shù);若大于2則報告其較小的數(shù)字。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最底的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。 若所有稀釋度均無菌落生長，則以小于1乘以最底稀釋倍數(shù)報告之。 若有稀釋度的平均菌菌落數(shù)均不在30—300之間，其中一部分大于300或小于30時，則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。 來源：營養(yǎng)瓊脂(NA)瓶裝顆粒培養(yǎng)基 |
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