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yangyang1991鐵桿木蟲 (著名寫手)
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測淀粉含量,最后吸光值很大,一直變化是怎么回事? 已有1人參與
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最近在測小麥籽粒的淀粉含量,由于樣品少,選擇了蒽酮法。之前做標線的時候,挺不錯的。但是測的時候,最后樣品的比色樣顏色很深,吸光值一直變化,有的最后直接變成20.00,這是怎么回事,光度計肯定是沒問題。 方法: 【試劑】 1.蒽酮乙酸乙酯試劑:取分析純蒽酮1g,溶于50ml乙酸乙酯中,貯于棕色瓶中,在黑暗中可保存數(shù)星期,如有結(jié)晶析出,可微熱溶解。 2.濃硫酸(比重1.84)。 9.2mol/L HClO4 可溶性糖的提取 取新鮮植物葉片,擦凈表面污物,剪碎混勻,稱取0.10~0.30g,共3份,或干材料。分別放入3支刻度試管中,加入5~10ml蒸餾水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液過濾入25ml容量瓶中,反復(fù)沖洗試管及殘渣,定容至刻度。 3.顯色測定 吸取樣品提取液0.5ml于20ml刻度試管中(重復(fù)2次),加蒸餾水1.5ml,向試管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯試劑和5ml濃硫酸,充分振蕩,立即將試管放入沸水浴中,逐管均準確保溫1min,取出后自然冷卻至室溫,以空白作參比,在630nm波長下測其光密度。 4. 將提取可溶性糖以后的殘渣,移入50ml容量瓶中,加20ml熱蒸餾水,放入沸水浴中煮沸15min,再加入9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷卻后,混勻,用濾紙過濾,并用蒸餾水定容(或以2500r/min離心10min)。測定同步驟3. |
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