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xujingyuanxu銅蟲 (正式寫手)
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植物生理研究中的蛋白免疫印跡 已有3人參與
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| 在做藥理實(shí)驗(yàn)中，用藥物刺激細(xì)胞后提取蛋白，為了檢測(cè)某個(gè)蛋白量的多少或者是否被磷酸化激活，可以采用Western blotting 來(lái)從檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白，可是做植物生理的時(shí)候如果想檢測(cè)某個(gè)蛋白是否被磷酸化或者蛋白量發(fā)生變化能用Western blotting 么？我看很多文獻(xiàn)上都有用，可是這些特異性的一抗和二抗要怎么選擇和購(gòu)買呢？好像許多抗體都是針對(duì)動(dòng)物細(xì)胞的吧？如果不可以的話是不是可以用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法來(lái)檢測(cè)某種蛋白是不是有含量變化 |
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5樓2015-01-27 22:29:02
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2樓2015-01-27 20:11:18
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3樓2015-01-27 21:19:22
【答案】應(yīng)助回帖
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抗體問題可以解決，麻煩的是家族蛋白的抗體，不容易得到。 mutant lines是一個(gè)實(shí)驗(yàn)室寶貴的資源財(cái)富，是幾帶博士們辛勤勞作的成果，沒錯(cuò)，一般情況下這些植株都是自己實(shí)驗(yàn)室培育的，所以說(shuō)優(yōu)秀的平臺(tái)會(huì)給你的工作上一個(gè)決定性的臺(tái)階。 對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料的選擇，要從自己實(shí)驗(yàn)出發(fā)，你的理解是正確的，但是一定注意所用的細(xì)胞系的來(lái)源。 |
4樓2015-01-27 22:12:03
xujingyuanxu
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6樓2015-01-28 09:55:56
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我是藥學(xué)的，對(duì)植物生理這方面不是很了解，最近看這方面的文獻(xiàn)有些費(fèi)力還望指點(diǎn)：圖片RbohD中的上標(biāo)S39A等是代表什么意思呢？還有下面的分組L2，L3也分別單表什么意思呢？還有CoIP得到的蛋白再用WB的方法來(lái)跑的話是不是還要再用一抗和二抗呢，怎么選擇呢？ 文章標(biāo)題The FLS2-Associated Kinase BIK1 Directly Phosphorylates the NADPH Oxidase RbohD to Control Plant Immunity 謝謝！ 3.png |
7樓2015-01-28 09:57:55
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9樓2015-01-28 17:14:22
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10樓2015-01-28 17:59:04
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