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chenying7459新蟲 (初入文壇)
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[求助]
DNA 的純化
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2.3.2 DNA 的純化 (1)加入 450μlTE 溶液于上述備用 DNA(50ul) 溶液中,充分混勻,加入等 體積酚:氯仿:異戊醇溶液(25:24:1),輕輕上下顛倒; (2)10000 轉(zhuǎn)/分離心 8 分鐘,吸取上清于另一 EP 管中,加等體積 酚:氯仿:異戊醇溶液,抽提一次; (3)如果上清液仍不澄清,重復(fù)(2)一次; (4)加入 0.2 倍體積 3mol/L 醋酸鈉溶液(PH=5.2)和 2 倍體積冷無水 乙醇,小心混勻后,10000 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘,棄上清; 各位大神,在上述步驟中---10000 轉(zhuǎn)/分離心 8 分鐘,吸取上清于另一 EP 管中,加等體積酚:氯仿:異戊醇溶液,抽提一次----這句話中吸取上清置另一EP中,上清是要還是丟棄?就是DNA是在上清中還是在沉淀里?這個(gè)等體積是多少?500還是1000啊?0.2倍體積是多少。坎欢。 |
木蟲 (小有名氣)
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DNA在上清。。純化是要蛋白質(zhì)變性沉淀。 等體積取決于你吸取上清多少,例如你就吸了100ul上清,那你等體積就是100ul。 0.2倍體積,同理,乘以上面你吸的體積。。。。 |
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