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寶唄茗新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求各位大神幫忙看看我的DNA電泳圖 已有9人參與
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求各位大神幫小妹看看點樣孔下面的那條帶是什么東西？怎么去除？ 我用的是CTAB法提取植物葉片的DNA，氯仿：異戊醇=24：1 抽提一次，無水乙醇沉淀一次，75%酒精洗兩次，但是雜質(zhì)還是很多，不知道點樣孔下面的那個是什么雜質(zhì)，用什么藥品可以去除呢？ 謝謝！ DNA 582.jpg |
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看了樓主的圖，有2點可以確定： 1.第7條泳道的那條特殊的條帶才是DNA。 2.最下面的那一排是沒有去除掉的已經(jīng)降解的RNA。需要用RNA酶消化才能去除RNA。 至于點樣孔里面的亮亮的東西，如果不是你跑膠人為造成的，應(yīng)該就是殘留的蛋白質(zhì)，你才抽提一次，我們一般都抽提3次，才能基本保證去除蛋白質(zhì)等大分子的雜質(zhì)。另外建議你重新跑一下膠，如果還是這樣的話，就說明應(yīng)該是我說的這種情況。 祝你好運。 |
12樓2015-02-03 10:44:25
wyzl2007
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2樓2015-02-01 22:37:32
寶唄茗
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3樓2015-02-01 22:39:03
still2008
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4樓2015-02-01 22:46:04
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5樓2015-02-01 23:13:17
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6樓2015-02-01 23:22:54
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7樓2015-02-01 23:24:04
李強1
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8樓2015-02-01 23:36:37
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9樓2015-02-02 12:38:30
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寶唄茗(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-02-05 22:01:59
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看marker就知道結(jié)果怎樣了，marker條帶不清楚且量很少。時間，電壓都是沒問題的。 最下面的一條亮帶我認(rèn)為不是你的目的條帶，你的目的片段大小是多少？雖然marker很模糊，但是還是能判斷大小的，可以知道亮帶是否是非特異性產(chǎn)物。還有膠濃度，好像marker沒有完全跑開，膠濃度和分子量是有關(guān)系的，分子量越大，膠濃度就越小。 如果真是沒有目的片段跑出來的話，就要考慮一下幾個方面：模板的提�。兌龋�，引物的合理性，PCR熱啟動酶的性能，以及擴增的時間溫度循環(huán)數(shù) |
10樓2015-02-02 13:20:58
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