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求大神解答Northern Blotting圖中拖尾原因及解決方案
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前幾次做Northern Blotting，用Roche的地高辛標記，曝光出來的總有拖尾，圖示，是用原核生物16S探針做的，雜交時間大概16h。請問拖尾原因是什么呢？RNA 轉(zhuǎn)膜前檢測了沒有明顯降解，會不會轉(zhuǎn)膜過程中出現(xiàn)了降解呢，轉(zhuǎn)膜用的是電轉(zhuǎn)儀轉(zhuǎn)的試劑什么的都是DEPC處理過的，20V，40-50min左右。另外會不會是因為探針加太多?或者雜交時間太長？或者洗的不夠？圖中應(yīng)該不會是非特異結(jié)合吧？ IMG_20150204_144634.jpg |
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2樓2015-02-06 09:35:44
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