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Abeta42 溶解問題 已有1人參與
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| 大家好，我的Amyloid beta 42 總是溶解不好。處理步驟是Abeta42凍干的1mg粉末先用1ml六氟異丙醇溶解后，37度搖床過夜，濃度1mg/ml, 取36uL 含有Abeta42的六氟異丙醇溶液于1.5ml的離心管中，然后用氮?dú)獯蹈�，再加�?uL DMSO助溶，最后加入400uL三次水溶解, 終濃度20uM。但是這樣處理后，溶液中有不溶解的小顆粒，溶液離心后，在離心管的底部有不溶物。大家有什么好的處理步驟嗎？請(qǐng)不吝賜教�。。。�！ |
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mataomatao
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2樓2015-03-12 11:07:27
mataomatao
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3樓2015-03-12 11:09:05
mataomatao
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fuyangQU: 金幣+80, ★★★很有幫助, 我再看看還有回復(fù)的沒，不全給你了 2015-03-13 16:54:38
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4樓2015-03-13 13:49:14
ajshen
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5樓2015-10-12 21:46:09
ajshen
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6樓2015-10-13 10:48:42
yls10
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7樓2016-03-10 09:38:47
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你好，基本上算是解決了，先加點(diǎn)DMSO助溶，渦旋，等看到基本溶解了，再加氫氧化鈉（PH=11~13），再加PBS緩沖到7.4，氫氧化鈉和PBS的比例我的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是這樣的你可以參考，但是也自己驗(yàn)證一下： NAOH PH=12時(shí)，由PBS稀釋20倍時(shí)，混合液PH=7.2 由PBS稀釋10倍時(shí)，混合液PH=7.4 由PBS稀釋5倍時(shí)，混合液PH=7.6 NAOH PH=13時(shí)，可以按照上面換算 另外強(qiáng)酸堿會(huì)水解Abeta，最好在堿液里不要存放過長(zhǎng)時(shí)間，稀釋完成后可以打質(zhì)譜或者跑膠看看分子有沒有被破壞。希望可以幫助你。 |
8樓2016-03-11 09:46:46
yls10
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9樓2016-03-15 12:37:57
10樓2016-03-15 18:55:27
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