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ritchiejin銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
請教論壇里各位專家關(guān)于做多肽的de novo測序遇到的問題? 已有1人參與
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本人初學(xué)生物質(zhì)譜,本單位的設(shè)備是Bruker的maXis ESI-Q-TOF。這段時間我一直在做合成多肽的de novo測序,遇到了一些問題,希望專家和蟲友們幫忙! (1)我已經(jīng)知道合成多肽的理論序列,想通過二級質(zhì)譜進行測序,之前做的是無修飾氨基酸序列,利用配套軟件就完成了,F(xiàn)在手里的樣品每個氨基酸都有復(fù)雜的修飾,我能僅靠手動去識別 y 離子 質(zhì)量差來確定被修飾的氨基酸么? (2)我得到的二級質(zhì)譜150m/z 以下的峰沒有(掃描范圍是50~2000m/z),我嘗試把collision energy調(diào)高一些,只是在150~200m/z的碎片信號強了一些。導(dǎo)致現(xiàn)在兩端兩個氨基酸無法得到碎片信息。我該怎么辦? (3)樣品單電荷峰為1631.7522,帶兩個電荷的峰為816.3778,在做全譜掃描時,雙電荷峰很強(100%),但是單電荷峰只有(0.25%),根本看不到,能調(diào)整么? |
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