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求助求助~用GC/FID測橄欖油里的甾醇(sterols)物質，神馬都跑不出來T—T
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之前一直在做液相色譜的，突然接到一個要用GC/FID的活，還催得特別急。在這里請大家?guī)臀铱纯吹降壮隽耸裁磫栴}。 標準方法是用30 m * 0.25 mm * 0.25 微米的DB-5柱子，進樣溫度280C，柱溫恒溫260C，檢測器300C，split ratio是15:1，進樣量1微升，載氣恒速1.5mL/min，氫氣：30mL/min，空氣：400mL/min，尾吹氣是氦氣：30mL/mim，跑一個樣55分鐘要的東西都出來了，各個峰分得也挺清楚的。我們實驗室只有一根30 m * 0.25 mm * 0.1 微米的DB-5HT柱子，我試了進樣溫度300C，柱溫280C，檢測器320C，60分鐘，其他設定都一樣，結果什么峰都沒有。。。連光跑標樣也跑不出來。。。然后各種換溫度還是啥都沒有。。。難道我試錯方向了嗎？或者跑的時間還不夠長？那個0.25和0.1微米的膜厚度跑出來結果能差那么多嗎？ 還有一個問題是，正式樣品是要經過TLC處理和甲硅烷基化的，有一個做了很久這個實驗的人告訴我光跑內標物5alpha-cholestan-3beta-ol的話直接上柱子就行，不需要甲硅烷基化。。。這樣真的沒問題嗎？會不會堵柱子？我用的是0.2%的5alpha-cholestan-3beta-ol（溶劑是乙酸乙酯）。 我實在沒頭緒了，想改成梯度也不知道怎么改。。。懇請版上各種大神不吝賜教！先謝過了！ |
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2樓2015-03-21 15:13:55
chihaijun
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4樓2015-03-23 04:27:53
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5樓2015-03-23 09:09:25
6樓2015-03-23 10:53:04
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