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蟈蟈小胖木蟲 (正式寫手)
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[交流]
神經(jīng)元細(xì)胞 膠質(zhì)細(xì)胞 共培養(yǎng) 已有1人參與
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| 請問有沒有做過神經(jīng)元細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)的呢？ 真心求protocol以及一些指點(diǎn)，謝謝各位了！ |
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lidong.0107
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- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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1、用95-100%的乙醇快速清洗分離的新鮮組織1次，再用預(yù)冷PBS洗2次。用解剖鑷子和剪刀去除組織中殘留的脂肪。 2、將組織樣品放入含上述消化液的無菌培養(yǎng)皿中，37℃消化1-3小時(shí)。 3、將消化后的組織低速離心（1000rpm）8分鐘，去除上清。 4、將細(xì)胞沉淀重懸于5ml的0.25%胰酶/EDTA中，置于37℃ 10分鐘。 5、加入10ml 含10% FBS 的DMEM，用70um孔徑的過濾器過濾細(xì)胞懸液，收集過濾后的細(xì)胞懸液，低速1000rpm 離心10 分鐘，去除上清。 6、加入10ml的PBS，洗1次，低速離心5分鐘。 7、重懸細(xì)胞沉淀于CO培養(yǎng)基中，接種于T25或T75的培養(yǎng)瓶中共培養(yǎng)。 |
2樓2015-03-24 10:39:14
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