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單腳酒杯新蟲 (初入文壇)
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[求助]
EMSA蛋白濃度梯度升高，探針帶有減弱，卻看不到蛋白帶，求助大家！ 已有3人參與
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求教各位，我用的試劑盒是Roche的DIG Gel Shift 2nd Generation. 這個探針和這個蛋白是肯定結(jié)合了的，我之前做出來過，這次只是想做一個梯度進(jìn)一步驗證一下，實驗條件（包括蛋白濃度的大概范圍，膠濃度，電泳條件等）和以前也沒什么區(qū)別，但卻看不出蛋白帶了（如圖片1所示，泳道1只有探針，泳道2-7是探針+依次加量的蛋白，泳道8是探針+蛋白+過量競爭探針），之后又做了一次，提高了探針濃度，結(jié)果更糟糕（如圖片2所示，泳道1只有探針，泳道2-7是探針+依次加量的蛋白，探針+蛋白+過量競爭探針的對照組沒有截入圖中）。請有經(jīng)驗的同學(xué)幫幫我，看看蛋白結(jié)合帶跑成這樣到底是什么原因，不勝感謝！ 圖片1.png 圖片2.png |
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2樓2015-04-14 09:39:45
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5樓2015-04-14 18:41:12
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6樓2015-04-16 10:00:03
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