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工大新年新蟲 (小有名氣)
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1.細(xì)胞裂解我用的RIPA裂解液強(qiáng)裂解的細(xì)胞半小時，加入了蛋白酶抑制劑 99比1 12%跑膠發(fā)現(xiàn)小分子蛋白條帶很弱。目的蛋白HO-1 28KD 2 WB轉(zhuǎn)膜MARKER可以看到轉(zhuǎn)的很漂亮 NC膜 11V 14分鐘，封閉 2，6,8,9小時都試過，一抗4度過夜，洗膜3次每次10分鐘。2抗兩小時，洗膜三次每次10分鐘，有時一兩小時，一抗1比500 1000都試過，二抗1比1000 2000也試過 發(fā)現(xiàn)壓片內(nèi)參 目的蛋白從來沒有出來過 求大神指導(dǎo) 用麗春紅染色轉(zhuǎn)膜轉(zhuǎn)上去了 |
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葉曉波1572
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2樓2015-04-14 13:42:38
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