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做發(fā)酵產(chǎn)物對淀粉酶和葡萄糖苷酶抑制率實驗，陽性對照抑制率為0是怎么回事
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做發(fā)酵產(chǎn)物對淀粉酶和葡萄糖苷酶抑制率實驗，以阿卡波糖標(biāo)準(zhǔn)品為陽性對照。但是在實驗時發(fā)現(xiàn)陽性對照的抑制率一直很低，連1%都不到，這是怎么回事？ 做預(yù)實驗時用的阿卡波糖片還有30%左右的抑制率，這是怎么回事呢？下面是我實驗方法。 1.原理：淀粉酶催化淀粉生成的還原糖與DNS試劑中的3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成棕色物質(zhì)，540nm測紫外吸收 2.實驗內(nèi)容 （0）空白對照管：0.2ml緩沖液+0.2ml緩沖液+0.4ml淀粉+2mlDNS （1）對照管：0.2ml緩沖液+0.2ml酶（6U/ml）+0.4ml淀粉+2mlDNS （2）本底管：0.2ml阿卡波糖+0.2ml緩沖液+0.4ml淀粉+2mlDNS （3）試樣管：0.2ml阿卡波糖+0.2ml酶（6U/ml）+0.4ml淀粉+2mlDNS說明：加到淀粉那里，37℃孵育10min，加DNS，100℃水浴10min終止,反應(yīng)之后加15ml冰水稀釋，再取1ml稀釋液加4ml冰水二次稀釋，540nm測吸光度。 計算公式：[1-（A3-A2）/（A1-A0）]×100% |
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