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in-fusion連接，農桿菌介導轉化真菌，但是第一步做連接時就出問題了 已有3人參與
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各位大俠，先說一下我的大體實驗。現有目的基因（這個基因本身我們的真菌里就有），和質粒（此質粒里有強啟動子）。我們實驗的最終目的是希望通過強啟動子使這個目的基因高表達。 現在是實驗的第一步，就是將目的基因導入質粒中。然后質粒轉入農桿菌，再用農桿菌侵染真菌。 第一步之后，拿到重組質粒，想看看目的基因有沒有導入進去，就進行了PCR擴增，但是跑膠時出現兩條帶，800bp和300bp。但是目的基因剛好是1100. 急求各位大俠分析一下，這是什么情況。。。。難道連接時目的基因斷了？ 另外，農桿菌介導轉化之后，與我的真菌侵染，我想加的強啟動子，是不是會隨機到任何基因前，那不是就沒有辦法保證高表達我的目的基因了嗎。 我是這方面的新手，懇請各位多多指導，謝謝。 |
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