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大明子么么噠新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細菌基因敲除的小伙伴看過來
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| 我在第二次同源重組后，挑出了13個單菌落，搖菌后，提基因組用左同源臂的上游引物和右同源臂的下游引物，PCR發(fā)現(xiàn)有8個菌P出了缺失500堿基的條帶，5個菌落P出了正常大小的條帶，以為敲除成功了，進一步用缺失片段的引物進行PCR，結(jié)果8個菌落P出了500左右的條帶還有好幾條雜帶，用出發(fā)菌株和恢復(fù)菌株做對照,P出了單一的500左右的條帶，想問問大家這是什么原因？是成功了還是失敗了，后面應(yīng)該怎么驗證呢 |
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