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[交流]
蚌的基因組DNA提取問題！
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Sample Text 蟲友們好，本人現(xiàn)在提取一種蚌的總DNA，提取多次，但每次提取好后，跑膠時(shí)，拖尾嚴(yán)重，而且都小于一萬bp，請(qǐng)問下這是什么原因啊？望高手們能給小弟指教一下！謝謝！ 注：用的苯酚，異戊醇，氯仿抽提法！ [ Last edited by 350784478 on 2009-7-13 at 13:47 ] |
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2樓2008-07-12 20:41:23
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3樓2008-07-16 06:25:27
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謝謝上面兩位大俠的幫助。 我的具體提取方法是: 1.取蚌的組織并洗凈后，加入緩沖液在65度下消化完全 2.加入等體積的酚，反復(fù)搖勻10min，12000rmp離心10min，取上清； 3.加入等體積的酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），反復(fù)搖勻10min，，12000rmp離心10min，取上清。 4.加入等體積的氯仿：異戊醇（24：1），反復(fù)搖勻10min，12000rmp離心10min，取上清 5.加入2倍體積冷凍無水乙醇，靜置3小時(shí)，混勻后12000rmp離心，棄上清 6.加入70%的乙醇，沖洗兩遍，12000rmp離心2min，室溫干燥 7.加入TE充分溶解，然后1%電泳跑膠檢測(cè)！ |
4樓2008-08-27 22:08:22
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