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行軍蟻銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
求大神賜教ABTS和DPPH的配置詳細(xì)方法 已有1人參與
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| 我要測皂苷的抗氧化能力，需要用到ABTS、DPPH，但是不知道如何配置，求詳細(xì)配置步驟以及注意事項(xiàng)。謝謝！急急急�。。� |
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行軍蟻
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2樓2015-05-12 15:52:21
shenyingbin
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【答案】應(yīng)助回帖
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方法：140 mmol/L過硫酸鉀溶液440μL與7mmol/L ABTS+溶液25 mL混合，避光反應(yīng)12-16小時(shí)，用乙醇稀釋ABTS+溶液至吸光值為0.7±0.002，取4.9mL ABTS+溶液與0.1 ml樣品混合，反應(yīng)10min，測定734 nm下吸光度。以溶于甲醇的Trolox溶液標(biāo)樣作標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品抗氧化能力用TEAC表示，空白為0.1 ml甲醇，得到清除率(y)與Trolox含量(x)之間的回歸方程。 公式：清除率=(A0-A)/A0×100％ A0為未加樣品的ABTS液的吸光值；A為樣品與ABTS液反應(yīng)后的吸光值。 DPPH 溶液的配制：準(zhǔn)確稱取7.88mg DPPH 用無水乙醇溶解，定容于100mL 容量瓶中，搖勻，配制為濃度2 ×10-4mol /L 的溶液，保存于冰箱中，備用。 通常的抗氧劑樣品溶液在實(shí)驗(yàn)條件下均幾乎無色，對DPPH 的測量不形成干擾，一般采用Larrauri 等[8]和Yokozawa 等[9]的方法進(jìn)行研究。但植物提取物中化學(xué)成分復(fù)雜，可能干擾吸光度的測定。因此，本實(shí)驗(yàn)參考楊懷霞等[10]和郭亞力等[11]的方法并進(jìn)行改進(jìn)，采用該法研究提取物的抗氧化活性可排除干擾。向2.5mLDPPH 的乙醇溶液中加入1mL 樣品，混合均勻，30min 后用分光光度計(jì)在517nm 波長處測定吸光度Ai，同時(shí)測定2.5mL DPPH 的乙醇溶液與 1.0mL 80%乙醇溶液混合液的吸光度AC 及2.5mL 乙醇與1.0mL 樣品混合液的吸光度Ab，計(jì)算清除率。 |
3樓2015-05-12 16:54:22
行軍蟻
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