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依然自然

新蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

9樓: Originally posted by mataomatao at 2015-05-13 20:25:25
能夠證明提取的是RNA？如果做核磁采個(gè)P譜還差不多；僅僅是紫外，有DNA等或者降解的RNA，蛋白，色素等污染跑膠不正常；是可以理解的

實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有核磁采個(gè)P譜的條件，還是謝謝你哈！

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生命就如旅行。。。。所以要一直笑著

11樓2015-05-14 09:47:21

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blackapple3731

木蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

10樓: Originally posted by 依然自然 at 2015-05-14 09:46:05
1.提取的時(shí)候，直到最后一次的75%乙醇水洗都還能看到小塊的乳白色的沉淀。
2.有在找有關(guān)CTAB提取的方法。
3.初提還不直到能稀釋在跑膠、點(diǎn)樣的，請(qǐng)問(wèn)你說(shuō)的稀釋是冰上直接用DEPC水稀釋，還是得加DEPC水再水浴溶解 ...

Marker 很亮說(shuō)明不是電泳槽的問(wèn)題，點(diǎn)樣的時(shí)候，混合一點(diǎn)loadingbuffer，可能是乙醇沒(méi)晾干，RNA有點(diǎn)飄

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其實(shí)我的專業(yè)是海洋化學(xué)

12樓2015-05-14 09:50:50

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781055707

木蟲(chóng) (著名寫手)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

沒(méi)提出來(lái)，總RNA離心以后是在管壁上的，洗時(shí)光洗底部是不夠的，要整個(gè)管都洗到位。

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采菊東籬下，悠然見(jiàn)南山。

13樓2015-05-14 11:42:12

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luwei13566

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引用回帖:

就你點(diǎn)樣用的那個(gè)RNA樣品稀釋，比如吸出來(lái)1ul，再加9ul的DEPC處理水或者是Rnase free water，就等于稀釋了10倍。
這會(huì)仔細(xì)看了看你的圖，發(fā)現(xiàn)其實(shí)你額膠中間還是有微弱的RNA帶的，但重點(diǎn)是從點(diǎn)樣孔拖尾，點(diǎn)樣孔被堵的可能性很大~但也不排除RNA被講解的可能。

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大家相互幫助哈

14樓2015-05-14 20:34:11

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小螞蟻蟲(chóng)

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

按照我們的說(shuō)法就是沒(méi)有提出來(lái)

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15樓2015-05-14 22:18:09

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

用TRIzol plant 或CTAB 或多糖多酚植物總RNA提取試劑盒

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16樓2015-05-15 11:14:51

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

請(qǐng)問(wèn)你電泳的時(shí)候電泳液是新配的嗎？不確定你是不是跑膠的時(shí)候降解了

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17樓2015-05-15 16:38:26

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商家已經(jīng)主動(dòng)聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容

蛋白污染嚴(yán)重，或者重新配電泳液再試一下

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18樓2015-05-19 01:52:54

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【答案】應(yīng)助回帖

目測(cè)基因組和多糖比較多，第二張圖中能隱約看到RNA18S條帶；關(guān)于稀釋：如提取的RNA較純，電泳上100ng就足夠能看到條帶，但是就你的電泳圖來(lái)看，RNA含量很低。

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19樓2015-05-19 10:34:09

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【答案】應(yīng)助回帖

引用回帖:

要是提個(gè)RNA都得做MRI，那做分子生物實(shí)驗(yàn)的同學(xué)們都要跪了。紫外分光光度計(jì)，電泳，RT-PCR個(gè)個(gè)都能證明提出來(lái)的是不是RNA。

樓主電泳沒(méi)跑好啊，第一個(gè)圖Marker都沒(méi)跑開(kāi)就不說(shuō)了，第二個(gè)圖Marker用的是啥？普通瓊脂糖膠跑RNA，最好用DL2000 DNA Marker，膠用0.8~1.2%，28S rRNA跑的位置和2000bp差不多。

前面有人答說(shuō)上樣量太大，建議稀釋，我覺(jué)得很有道理。4.5ug/uL啊，這濃度！一般用個(gè)300-400ng跑電泳就能看得比較清楚了。

另外就是試試CTAB法，或者買個(gè)植物總RNA提取試劑盒。

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20樓2015-05-19 10:41:35

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