 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 4691 | 回復: 22 | ||
[求助]
RNA提取時，濃度4252.2，A260/280=1.99，但電泳跑不出RNA，原因是？ 已有10人參與
|
||
|
我在提取RNA時，取樣0.1g，新鮮樣品現(xiàn)磨，用的Trizol提取法。結果RNA的濃度可以，2.0>A260/280>1.8，A260/230>2.0。但跑膠時沒有RNA出現(xiàn)，只有點樣孔很亮，和DNA Marker條帶（圖1）。跑膠時采用點樣體系：DNA Loading Buffer、DNA Marker、Gel stain（核酸染料）各2ul，上樣量2ul。跑膠條件：U=100V、I 隨意，時間12min。出現(xiàn)問題之后，我采用大電泳槽電泳，電泳條件為：U=220V、I 隨意、時間15min。結果是RNA拖尾，DNA Marker更清楚（圖2）。請問這種問題可能是由于什么原因造成的？誰有好主意接下來我該做些什么測試才能找出問題和解決問題？謝謝！ 圖1.jpg 圖2.jpg |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經有199人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經有0人回復
-
納米粒度分析
已經有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經有0人回復
-
留學--博士招生
已經有16人回復
-
化學工程，本211，求調劑，ab區(qū)不限
已經有4人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調劑
已經有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 姜的總RNA提取，電泳只有一條帶
已經有29人回復
- DNA電泳中，如果基因片段有RNA或蛋白等雜質時，跑電泳會出現(xiàn)什么異�，F(xiàn)象嗎
已經有6人回復
- 為什么在RNA瓊脂糖凝膠電泳時，樣品在加入到凝膠上之前要先在65oC下處理15min？
已經有5人回復
- 總RNA提取完跑電泳步驟
已經有16人回復
- 瓊脂糖電泳rna ，跑成這樣，是怎么回事？求指導
已經有19人回復
- RNA提取電泳效果不好
已經有12人回復
- RNA A260/280>2 是神馬情況？
已經有20人回復
- 提取的RNA 濃度低還能做電泳檢測質量嗎？
已經有3人回復
- 關于總RNA提取后的電泳條帶
已經有6人回復
- 【求助/交流】擬南芥保衛(wèi)細胞原生質體RNA提取電泳圖，出現(xiàn)反向彌散？
已經有6人回復
- CTAB法提取RNA,電泳后完全無條帶
已經有5人回復
- RNA 提取后，電泳顯示全部為5s處彌散片段，求幫助
已經有21人回復
- 提取RNA后跑電泳，條帶非常不清晰怎么回事��？我是新手，謝謝啦！
已經有6人回復
- 植物RNA提取電泳圖，求解析！
已經有3人回復
- 植物RNA提取后電泳檢測
已經有16人回復
- 提取RNA電泳上樣量
已經有21人回復
- 細菌RNA提取后跑電泳出現(xiàn)一條暗帶和在泳道中彌散都是什么原因？
已經有9人回復
- 【求助/交流】RNA提取后跑電泳鑒定時膠的濃度是多少
已經有12人回復
holyala
木蟲 (著名寫手)
磚家
- MolEPI: 7
- 應助: 19 (小學生)
- 貴賓: 0.001
- 金幣: 1137.7
- 散金: 322
- 紅花: 20
- 帖子: 1866
- 在線: 267.8小時
- 蟲號: 457557
- 注冊: 2007-11-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因組學
20樓2015-05-19 10:41:35
小螞蟻蟲
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 36 (小學生)
- 金幣: 3331.1
- 散金: 500
- 紅花: 2
- 帖子: 1081
- 在線: 175.9小時
- 蟲號: 1828283
- 注冊: 2012-05-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞信號轉導
15樓2015-05-14 22:18:09
2樓2015-05-13 15:43:17
3樓2015-05-13 18:22:19
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 639 (博士)
- 金幣: 8720.2
- 紅花: 37
- 帖子: 1700
- 在線: 269.3小時
- 蟲號: 322365
- 注冊: 2007-03-11
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
4樓2015-05-13 18:28:00
依然自然5樓2015-05-13 19:25:12
|
初提，很多不懂，就按程序走了一遍 看看哪里會錯，后面好加以注意。你說的沒提出來，是看膠就能看出來的是不？我提的步驟： 1.取0.1g新鮮葉片，液氮研磨，加1ml Trizol于研缽中，待快溶解時再研磨，后將研磨液移至預冷離心管，加200ul氯仿，劇烈震蕩15s，室溫靜置10min，13000r/min、4、15min。 2.移上清，加500ul預冷的異丙醇，劇烈震蕩15s、4、靜置10min。4、13000r/min、10min。 3.棄上清，加500ul 75%乙醇，上下震蕩15s，4、13000r/min、15min。 4.棄上清，風干75%乙醇，加100ulDEPC-water 55 溶解5min. 5.加130ul 酸性酚，4、13000r/min、15min。 6.移上清至新離心管，加入等體積氯仿，4、13000r/min、15min。 7.移上清至新離心管，加1/10體積的NaAc、2倍體積的100%乙醇，4、13000r/min、15min。 8.棄上清，加500ul 75%乙醇，上下震蕩15s，4、13000r/min、15min。 9.棄上清，風干75%乙醇，加10ulDEPC-water 55 溶解5min. 10.取2ul測濃度，2ul點樣。 以上是我的實驗過程，麻煩幫我看看哪里出錯了？我提的是多酚多糖類植物的葉片RNA。 謝謝指點！ |
6樓2015-05-13 19:42:35
7樓2015-05-13 19:49:46
luwei13566
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應助: 184 (高中生)
- 金幣: 4351.4
- 散金: 97
- 紅花: 35
- 帖子: 641
- 在線: 261.1小時
- 蟲號: 2380655
- 注冊: 2013-03-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
依然自然(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-05-15 19:34:31
感謝參與，應助指數(shù) +1
依然自然(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-05-15 19:34:31
|
1.提取RNA的時候RNA的顏色有沒有變深？ 2.如果真是多糖多酚污染的話，聽說有一種CTAB提植物RNA的方法，LZ可以去查一查。 3.其實可能最簡便的解決方法就是把你現(xiàn)在提取樣品稀釋個100倍再跑個膠看看，你提的濃度那么大，隨便混雜點多酚沉淀就把你點樣孔給堵了，先先稀釋了跑一下看看能不能跑出孔，如果實在是你RNA全給結合了話只有試一試專門的試劑盒了！~你的提取方法是沒有問題的 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
8樓2015-05-13 20:20:20
mataomatao
禁蟲 (正式寫手)
9樓2015-05-13 20:25:25
10樓2015-05-14 09:46:05
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 依然自然 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070300一志愿211，312分求調劑院校 +4 | 小黃鴨寶 2026-03-30 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 332求調劑 +10 | 032500 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料專碩 085600求調劑 +3 | BBQ233 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085404求調劑，總分309，本科經歷較為豐富 +6 | 來財aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調劑 +4 | QiMing7 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 281求調劑 +4 | 亞克西good 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 070300化學354求調劑 +6 | 101次希望 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 343求調劑 +6 | 愛羈絆 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 招收生物學/細胞生物學調劑 +4 | IceGuo 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 083000學碩274求調劑 +8 | Li李魚 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 071000生物學求調劑，初試成績343 +7 | 小小甜面團 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 312，生物學求調劑 +3 | 小譯同學abc 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 331環(huán)境科學與工程求調劑 +3 | 熠然好運氣 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070300化學求調劑 +4 | 起個名咋這么難 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 265求調劑11408 +3 | 劉小鹿lu 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 298調劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學一志愿南京師范大學303求調劑 +3 | zzffylgg 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[碩博家園] 北京林業(yè)大學碩導招生廣告 +6 | kongweilin 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研]
 304材料求調劑
+4
|
鐘llll 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 290分調劑求助 +3 | 吉祥止止陳 2026-03-25 | 3/150 |
|