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細(xì)菌RNA提取后跑電泳出現(xiàn)一條暗帶和在泳道中彌散都是什么原因？
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| 之前提取細(xì)菌的RNA都能看到3條條帶，但是前幾次提取后跑膠，只在2000以下的地方有比較寬的黑色條帶，沒有亮的條帶；這幾天提取后能看見有亮的在泳道中，并且是maker跑得范圍內(nèi)，但是呈彌散狀態(tài)，看不見是一條條的條帶，OD260/OD280為1.3-1.5，濃度在280-460ug/ml（如果要做后續(xù)的實驗，需要500ug/ml以上，有什么方法增大RNA的濃度嗎？），有人說是蛋白或酚污染，但是經(jīng)過這么多次的提取，該注意的應(yīng)該還挺小心的，并且多次出現(xiàn)這兩種情況，應(yīng)該不是偶然，但是現(xiàn)在就是找不到原因了，希望有類似經(jīng)歷的大俠給予指點！提RNA提不出來，還找不到原因的痛苦你懂的！多謝各位了！ |
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2樓2011-11-23 10:50:59
lvbobo823
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
3樓2011-11-23 12:55:18
4樓2011-11-23 13:59:24
5樓2011-11-24 10:43:02
6樓2011-11-24 10:51:00
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
wanhscn(金幣+2): 鼓勵應(yīng)助！ 2011-11-24 22:04:21
可可-LZW(金幣+1): Thank you ~ 2011-11-25 10:12:16
wanhscn(金幣+2): 鼓勵應(yīng)助！ 2011-11-24 22:04:21
可可-LZW(金幣+1): Thank you ~ 2011-11-25 10:12:16
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什么叫用柱子吸附再用乙醇和異丙醇洗？？？一般用試劑盒的柱子吸附不是試劑盒本身有洗液的嗎？ 原來提得出來現(xiàn)在不一定提的出來。 用少量的水溶解指的是： 就是說你得到一團(tuán)在管底的RNA沉淀，用75%乙醇洗過然后干燥，你可以加入1ml DEPC水溶解該團(tuán)沉淀，假設(shè)得到10ng/ul的RNA 。而你也可以加入10ul DEPC水溶解該團(tuán)沉淀，得到的是1000ng/ul 的RNA，視你所需濃度而定。 you like |
7樓2011-11-24 15:28:53
8樓2013-06-26 19:45:45
9樓2014-04-12 22:06:42
Neo2000
木蟲 (著名寫手)
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10樓2014-04-12 22:51:25
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