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cjzyfx木蟲 (正式寫手)
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[求助]
RNA 提取的一些問題,請大家?guī)兔卮?
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1 RNA提取的時候怎么樣有效的避免DNA的污染? 2 RNA提取后在-20放置,可保存多久? 3 大家用的trizol是自己配的還是買的? 謝謝啊 |
生物信息學(xué)軟件應(yīng)用 | 【分子生物】EPI帖 | 分子實驗技術(shù)收集 |

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1、在提取過程增加DNase消化步驟。除使用酶消化外的方法去DNA都不是很徹底。視后續(xù)實驗而定。 2、如有條件最好放-80保存。主要擔(dān)心是如果提得不純(有雜質(zhì)或未完全滅活的RNase)在-20度保存過程中降解。且這個保存時間跟物種、提取方法等有關(guān)。嘗試過有些物種的RNA放-20度保存一個月后出現(xiàn)降解的情況(未知是提得不純或物種原因) 3、實驗要求不高可以自己配點Trizol來提,如果重要的實驗建議還是購買invitrogen的。 |

鐵蟲 (小有名氣)
銀蟲 (正式寫手)

新蟲 (初入文壇)
新蟲 (小有名氣)
新蟲 (初入文壇)
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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1.RNA提取注意事項很多,但都是一個目的:放置降解和雜質(zhì)干擾,特別是降解。相關(guān)儀器的DEPC處理自不必說,還有操作臺面以及移液器的75%乙醇擦拭、研缽的180度處理,再就是操作者的口罩手套防護,操作過程的低溫保持等等。 2. 提取的RNA我從來不放到-20度,除非幾分鐘之后馬上進行下面的操作,避免反復(fù)凍融。倒是有一次一個同學(xué)勿放到-20度約一個月,基本不能用了。 3. Trizol都是買的,一直用的寶生物,好像很可以。 |
金蟲 (小有名氣)
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