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lmcyjxs金蟲 (正式寫手)
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[求助]
急,請大家?guī)蛶兔Γ梢允覝爻恋鞷NA嗎?
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問題如題,我前天用CTAB法提RNA,抽提溶液自制,LiCL沉淀RNA -20℃冰箱沉淀4小時后無沉淀,我覺得是失敗了(其實也可能沒,只是當(dāng)時我不知道RNA是無色膠狀的沉淀,以為是肉眼清晰可見的白色沉淀,查了資料才知道可能是這樣的)就想不要了,后放于室溫,過了兩天,發(fā)現(xiàn)有白色絮狀沉淀了,先又放回了-20℃冰箱凍著。 現(xiàn)在我想問,這些可能是RNA嗎?RNA的沉淀都是無色膠狀的嗎? 請各位高手指點,小妹初次接觸這行,已經(jīng)提過兩次了,都是一樣的情況,心里面好失落!眼看整個暑假就差不多過去了,俺還不能回家,沒做成績出來的話,還怎么混啊 |

金蟲 (正式寫手)
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能否繼續(xù)請教一下一些細節(jié)問題? 1、溶液的配制,用于提RNA的tris溶液你是用DEPC滅菌水配的嗎?還是直接去離子水配的?這些用來裝各溶液的瓶子你有沒有用DEPC水浸泡過? 2、那些tips和離心管我只用了高壓高溫滅菌,沒有用DEPC水浸泡過,這樣會很影響實驗嗎?你在做實驗的時候有用DEPC水泡過嗎? 3、配制CTAB-tris溶液時,里面一些試劑的添加入順序有影響嗎? 4、你看到的RNA沉淀是什么樣的呢?不是無色透明的膠狀沉淀嗎? 5、提RNA的時候,你覺得最關(guān)鍵的步驟在于哪里? 我初次接觸這些,提過3次了,都感覺看不到沉淀,也不知道是不是試劑的問題,還是操作的問題。。。對于以上問題,很希望可以交流交流!謝謝啦 |


木蟲 (正式寫手)
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金蟲 (正式寫手)

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