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lmcyjxs金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
急，請(qǐng)大家?guī)蛶兔Γ梢允覝爻恋鞷NA嗎？
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問(wèn)題如題，我前天用CTAB法提RNA，抽提溶液自制，LiCL沉淀RNA -20℃冰箱沉淀4小時(shí)后無(wú)沉淀，我覺(jué)得是失敗了（其實(shí)也可能沒(méi)，只是當(dāng)時(shí)我不知道RNA是無(wú)色膠狀的沉淀，以為是肉眼清晰可見(jiàn)的白色沉淀，查了資料才知道可能是這樣的）就想不要了，后放于室溫，過(guò)了兩天，發(fā)現(xiàn)有白色絮狀沉淀了，先又放回了-20℃冰箱凍著。 現(xiàn)在我想問(wèn)，這些可能是RNA嗎？RNA的沉淀都是無(wú)色膠狀的嗎？ 請(qǐng)各位高手指點(diǎn)，小妹初次接觸這行，已經(jīng)提過(guò)兩次了，都是一樣的情況，心里面好失落�。⊙劭凑麄�(gè)暑假就差不多過(guò)去了，俺還不能回家，沒(méi)做成績(jī)出來(lái)的話，還怎么混啊  |
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chenguestc
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-08-08 14:24:55
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| 如果是放-20度冰箱問(wèn)題不大，樓主先溶解后測(cè)個(gè)濃度，跑個(gè)膠看下質(zhì)量再說(shuō)。我的RNA就是放在-20度的，不過(guò)是溶解后放的，完全沒(méi)有問(wèn)題，1，2個(gè)月之后測(cè)濃度，和最開(kāi)始沒(méi)有差異，跑膠看質(zhì)量也非常好。 |
5樓2012-08-08 00:02:06
2樓2012-08-06 09:39:56
殘?bào)?/a>
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2012-08-06 11:30:21
lmcyjxs
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lmcyjxs: 回帖置頂 2012-08-08 10:32:46
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能否繼續(xù)請(qǐng)教一下一些細(xì)節(jié)問(wèn)題？ 1、溶液的配制，用于提RNA的tris溶液你是用DEPC滅菌水配的嗎？還是直接去離子水配的？這些用來(lái)裝各溶液的瓶子你有沒(méi)有用DEPC水浸泡過(guò)？ 2、那些tips和離心管我只用了高壓高溫滅菌，沒(méi)有用DEPC水浸泡過(guò)，這樣會(huì)很影響實(shí)驗(yàn)嗎？你在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候有用DEPC水泡過(guò)嗎？ 3、配制CTAB-tris溶液時(shí)，里面一些試劑的添加入順序有影響嗎？ 4、你看到的RNA沉淀是什么樣的呢？不是無(wú)色透明的膠狀沉淀嗎？ 5、提RNA的時(shí)候，你覺(jué)得最關(guān)鍵的步驟在于哪里？ 我初次接觸這些，提過(guò)3次了，都感覺(jué)看不到沉淀，也不知道是不是試劑的問(wèn)題，還是操作的問(wèn)題。。。對(duì)于以上問(wèn)題，很希望可以交流交流！謝謝啦 |
4樓2012-08-07 22:48:29
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